[发明专利]一种重组人肌红蛋白的表达纯化方法在审
| 申请号： | 201810502489.0 | 申请日： | 2018-05-23 |
| 公开（公告）号： | CN108410899A | 公开（公告）日： | 2018-08-17 |
| 发明（设计）人： | 许德晨;景宏维;黄力;杨红 | 申请（专利权）人： | 基蛋生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/12;C07K14/805 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 李佳 |
| 地址： | 210000 江苏省南京*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及临床医学检测和诊断领域，具体而言，涉及一种重组人肌红蛋白的表达纯化方法，所述方法包括：将重组人肌红蛋白基因序列连入大肠杆菌表达载体，获得人肌红蛋白表达质粒，将所述质粒转化到大肠杆菌得到转化子；对所述转化子扩大培养诱导表达后将细胞破碎、离心后收集上清；表达出的重组人肌红蛋白N端含有Trx‑(His)6融合标签；将所述上清经滤膜过滤后用Ni‑柱亲和层析，洗脱后即得重组人肌红蛋白。本发明所述方法制备的重组人肌红蛋白表现出高产率、高活性及高稳定性的特征，适用于体外诊断原料的要求。 | ||
| 搜索关键词： | 人肌红蛋白 转化子 人肌红蛋白基因 大肠杆菌表达 临床医学检测 柱亲和层析 大肠杆菌 表达质粒 高稳定性 扩大培养 滤膜过滤 融合标签 体外诊断 细胞破碎 诱导表达 质粒转化 高产率 高活性 洗脱 制备 诊断 表现 | ||
【主权项】：
1.一种重组人肌红蛋白的表达纯化方法，其特征在于，包括：将重组人肌红蛋白基因序列连入大肠杆菌表达载体，获得人肌红蛋白表达质粒，将所述质粒转化到大肠杆菌得到转化子；对所述转化子扩大培养诱导表达后将细胞破碎、离心后收集上清；表达出的重组人肌红蛋白N端含有Trx‑(His)6融合标签；将所述上清经滤膜过滤后用Ni‑柱亲和层析，洗脱后即得重组人肌红蛋白。
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