[发明专利]一种利用HPLC测定蓝花丹中白花丹素含量的方法

摘要

本发明提供了一种利用HPLC测定蓝花丹中白花丹素含量的方法，属于化学检测技术领域。本发明提供的测定方法包括如下步骤：1)样品采集、烘样及粉碎；2)标准品储备液制备及绘制标准曲线；3)样品液的制备；4)样品液中白花丹素含量测定。称取蓝花丹样品粉末0.5g，用25mL甲醇溶解，超声波处理30min，过0.22μm滤头后注入高效液相色谱仪中进行测定，根据线性回归方程计算样品液中白花丹素的含量。本发明旨在提供一种操作更简便、结果准确且真实可靠的蓝花丹中白花丹素含量的测定方法，无需长时间的抽取过程，可很好作为蓝花丹质量控制。

主权项

1.一种利用HPLC测定蓝花丹中白花丹素含量的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)样品采集、烘干及粉碎：采集蓝花丹植株的组织样品材料，进行烘干后制成样品粉末；(2)标准品储备液的制备及标准曲线的绘制：称取标准品白花丹素5.1mg，置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀后得到标准品储备液A；吸取标准品储备液A2.0mL，置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀后得到标准品储备液B；吸取标准品储备液B 1.0mL，置于25mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀后得到标准品储备液C；依次取标准品储备液A 1μL、5μL、15μL、20μL、40μL，标准品储备液B 1μL、5μL、10μL，标准品储备液C 1μL、5μL、15μL，分别注入高效液相色谱仪中，以进样量为横坐标，测得的峰面积为纵坐标，用峰面积的平均值建立校准曲线的相关系数，绘制标准曲线，得到白花丹素的线性回归方程；(3)样品液的制备及样品液中白花丹素含量测定：取步骤(1)所得蓝花丹样品粉末0.5g，用25mL甲醇溶解，超声波处理30min，过0.22μm滤头后注入高效液相色谱仪中进行测定，根据线性回归方程计算样品液中白花丹素的含量；高效液相色谱仪采用的色谱条件包含如下：流动相：A液为0.1％(V:V)的H3PO4‑水溶液，B液为甲醇；梯度洗脱程序：0min、0:40(VA:VB)；21min、25:75(VA:VB)；23min、10:90(VA:VB)；30min、10:90(VA:VB)。