[发明专利]人Cx43基因干扰序列、shRNA-Cx43病毒及低表达Cx43蛋白的细胞系在审
申请号: | 201810412674.0 | 申请日: | 2018-05-03 |
公开(公告)号: | CN108588075A | 公开(公告)日: | 2018-09-28 |
发明(设计)人: | 方卫斌;张海灵 | 申请(专利权)人: | 天德悦(北京)生物科技有限责任公司 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/867;C12N5/10 |
代理公司: | 北京集智东方知识产权代理有限公司 11578 | 代理人: | 陈亚斌;关兆辉 |
地址: | 102200 北京市昌平区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种人Cx43基因干扰序列,如SEQ ID NO1所示。还公开了一种人shRNA‑Cx43病毒,为SEQ ID NO1所示的序列构建到表达质粒中。还公开了一种低表达Cx43蛋白的细胞系,为被shRNA‑Cx43病毒感染的软骨细胞。本发明通过分子生物学手段将人Cx43基因干扰片段构建入慢病毒载体的U6启动子下游。实现在干扰目的基因的同时表达绿色荧光蛋白EGFP和puromycin抗性基因,前者便于观察载体工作状态,后者方便筛选目的基因干扰的稳定细胞株。构建的质粒包装慢病毒,用于稳定株的筛选。在软骨细胞中低表达connexin43的稳定细胞系,可用于研究低表达connexin43所引起的相关炎性因子表达量的变化,从而找到有效治疗关节炎的策略。 | ||
搜索关键词: | 低表达 基因干扰 目的基因 软骨细胞 绿色荧光蛋白EGFP 分子生物学手段 病毒 筛选 炎性因子表达 慢病毒载体 稳定细胞系 稳定细胞株 表达质粒 病毒感染 抗性基因 片段构建 序列构建 有效治疗 关节炎 慢病毒 构建 可用 质粒 观察 研究 | ||
【主权项】:
1.一种人Cx43基因干扰序列,如SEQ ID NO1所示。
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