[发明专利]一种枯草芽孢杆菌互补培养的菌种加密性菌剂生产方法有效
申请号: | 201810316006.8 | 申请日: | 2018-04-10 |
公开(公告)号: | CN108531435B | 公开(公告)日: | 2020-09-22 |
发明(设计)人: | 张学文;陈金军;赵燕;罗慧敏;黄丽华;高晗 | 申请(专利权)人: | 湖南农业大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/75;C12R1/125 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 刘奇 |
地址: | 410000 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 一种枯草芽孢杆菌互补培养的菌种加密性菌剂生产方法,包括以下步骤:基因编辑法定向突变和/或敲除生产枯草芽孢杆菌的特定营养基因,构建基因编辑载体;转化目标枯草芽孢杆菌,筛选成功基因编辑的特定营养物依赖型菌作为生产菌;筛选出上述特定营养物的普通枯草芽孢杆菌作为营养菌;分别培养所述生产菌与营养菌,作为菌剂生产发酵的种子菌;将营养菌和生产菌混合进行菌剂生产的规模培养即得。本发明采用基因编辑法对重要商用价值的枯草芽孢杆菌生产菌进行特定营养物质合成基因的定向突变和敲除,可以有效培育出特定营养物质依赖型的生产菌菌种,降低商业菌剂中菌种扩散和流失的风险。 | ||
搜索关键词: | 一种 枯草 芽孢 杆菌 互补 培养 菌种 加密 性菌剂 生产 方法 | ||
【主权项】:
1.一种枯草芽孢杆菌互补培养的菌种加密性菌剂生产方法,其特征在于,包括以下步骤:1)、基因编辑法定向突变和/或敲除生产枯草芽孢杆菌的特定营养基因,构建基因编辑载体;2)、将构建的基因编辑载体转化到目标枯草芽孢杆菌,并从中筛选特定营养基因编辑改造的枯草芽孢杆菌作为生产菌;3)、针对性筛选能分泌表达步骤2)所述特定营养物的普通枯草芽孢杆菌,作为营养菌;4)、分别培养所述生产菌与营养菌,作为菌剂生产发酵的种子菌。5)、将营养菌和生产菌混合进行菌剂生产的规模培养即得。
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