[发明专利]一种小麦三位点表达HMW-GS数目变异全套近等基因系的创制方法

摘要

本发明公开了一种小麦三位点表达的HMW‑GS数目变异全套近等基因系的创制方法，以3个Glu‑1位点均不表达HMW‑GS的(0个)小麦为母本，3个Glu‑1位点表达3‑5个HMW‑GS的小麦为父本杂交产生相应的3位点基因型杂合F1。在F2‑F5均依据蛋白表型分离情况推断基因型并选择基因型与F1相同的目标单株自交。在F5基因型杂合株内鉴定所有HMW‑GS组合类型并分类种植，F6鉴定HMW‑GS基因型纯合的全部组合类型，即构成了1套HMW‑GS数目从0‑4/5个梯度变化，组成不同的小麦HMW‑GS近等基因系。

主权项

1.一种小麦三位点表达的HMW‑GS数目变异全套近等基因系的创制方法，其特征在于，包括以下操作：1)以A、B和D 3个基因组Glu‑1位点所有HMW‑GS均不表达的小麦为母本，以Glu‑A1,Glu‑B1和Glu‑D1 3个Glu‑1位点均表达、表达数目为3‑5个HMW‑GS的小麦为父本，进行杂交得到F1种子；2)将F1种子分单粒种植于大田，开花前套袋自交，然后分别收获单株F2种子，选取其中两株种子数100粒以上的F2种子用于SDS‑PAGE鉴定HMW‑GS组成，在所选的每个单株中选择HMW‑GS组成与原父本HMW‑GS蛋白表现型相同的所有含胚大半粒种子继续种植，其余舍掉；3)将选中的F2种子分单粒种植成F3株系，开花前套袋自交，单株收获F3种子；4)每个F3单株中随机选取10粒种子，分单粒利用半粒法SDS‑PAGE鉴定HMW‑GS组成；选择单株内A、B和D 3个基因组的Glu‑1位点HMW‑GS都在分离的单株为目标单株，目标单株内所有种子分单粒鉴定HMW‑GS组成，选择与原父本具有相同HMW‑GS蛋白组成的所有单粒种子继续种植；5)重复步骤4)的自交步骤从F4到F5,从F5的目标单株中鉴定所有种子的组成，并按HMW‑GS表现型进行归类种植，在F6代鉴定出HMW‑GS基因型纯合稳定的全套近等基因系。