[发明专利]用于无背景检测血液中癌症抗原含量的基于X射线激发的镧系荧光纳米粒子的试剂盒及制备

摘要

本发明涉及一种用于无背景检测血液中癌症抗原含量的基于X射线激发的镧系荧光纳米粒子的试剂盒及制备，属于生物医学领域。本发明利用AFP一抗修饰的磁珠作为癌症抗原的捕捉探针，利用AFP二抗修饰的可被X射线激发发光的镧系稀土纳米粒子作为荧光标记，加入不同浓度相同体积的AFP标准液，经过洗涤和磁性分离后，在X射线激发下，检测不同浓度AFP存在下体系的荧光强度，得到荧光强度—AFP浓度标准工作曲线；将待测样在X射线诱导下的荧光强度代入标准工作曲线，即可得到待测样中的AFP浓度。利用X射线作为激发光源检测血清中的癌症标志物可有效避免自体荧光的干扰，提高灵敏度，操作过程简便，灵敏度高，结果准确。

主权项

1.一种用于无背景检测血液中癌症抗原含量的基于X射线激发的镧系荧光纳米粒子的试剂盒的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：1）基于X射线激发的镧系荧光纳米粒子NaGdF4:Tb@NaYF4的合成；2）标记AFP二抗的镧系荧光纳米粒子的制备：对镧系荧光纳米粒子进行表面改性后，偶联AFP二抗，制得标记AFP二抗的镧系荧光纳米粒子；3）标准曲线的构建：向均匀的修饰有AFP一抗的免疫磁珠体系中分别加入不同浓度相同体积的AFP标准液，经过洗涤和磁性分离后，往体系中加入标记AFP二抗的镧系荧光纳米粒子，标记AFP二抗的镧系荧光纳米粒子通过抗原‑抗体反应标记在AFP上，形成AFP捕获抗体/AFP抗原/AFP检测抗体的三明治结构，经过洗涤和磁性分离后，在X射线激发下，检测不同浓度AFP存在下体系的荧光强度，将荧光强度与AFP浓度一一对应，得到荧光强度—AFP浓度标准工作曲线；将待测样在X射线诱导下的荧光强度代入标准曲线方程：y=13.63x+87.57，即可得到待测样中的AFP浓度。