[发明专利]一种10-羟基喜树碱/卟啉类光敏剂复合制剂的制备方法

摘要

一种10‑羟基喜树碱/卟啉类光敏剂复合制剂的制备方法，它涉及一种卟啉类光敏剂复合制剂的制备方法。本发明是要解决现有的卟啉类化合物光敏剂对于抑制癌细胞存活率效果不佳的技术问题。本发明：一、制备二聚L‑谷氨酸；二、制备四聚L‑谷氨酸；三、制备六聚L‑谷氨酸；四、制备六聚谷氨酸键联卟啉二聚物；五、制备10‑羟基喜树碱/卟啉类光敏剂复合制剂。本发明的10‑羟基喜树碱/卟啉类光敏剂复合制剂应用于抑制癌细胞的存活率。本发明的10‑羟基喜树碱/卟啉类光敏剂复合制剂在光照40min的条件下可以使癌细胞的存活存活率降低至10％。

主权项

1.一种10‑羟基喜树碱/卟啉类光敏剂复合制剂的制备方法，其特征在于10‑羟基喜树碱/卟啉类光敏剂复合制剂的制备方法是按以下步骤进行的：一、将12.4g～14.7g的L－谷氨酸和100mL～150mL水混合均匀，控制搅拌速度为800r/min～1200r/min，搅拌至L－谷氨酸完全溶解，加入16g～20g醋酸酐，然后加热至80℃～90℃，继续控制搅拌速度为800r/min～1200r/min，搅拌30min～50min，冷却到室温，控制温度为‑20℃，保持12h～24h，然后抽滤，利用0℃～4℃的冰水洗涤滤层，自然晾干后在60℃～80℃条件下，进行真空升华分离，得到升华的白色雪花状结晶产物二聚L‑谷氨酸和不升华的灰白色固体产物氨基被保护的谷氨酸；二、将50mL～71mL二氯亚砜和120mg～128mg步骤一得到的二聚L‑谷氨酸在室温条件下混合均匀，加热到76℃～80℃，保持该反应条件继续反应2h～4h，然后在减压条件下，蒸馏直到无馏分蒸出为止，得到反应液，控制搅拌速度为800r/min～1200r/min，将反应液冷却到室温，再加入29.4mg～35.0mg的L‑谷氨酸，并且继续搅拌反应6h～8h，加入100mL～200mL二次蒸馏水，控制温度为0℃～4℃过滤，向滤液中加入12g～16g醋酸酐，加热至80℃～90℃，连续搅拌30min～50min，然后在温度为‑20℃条件下保持8h～12h，过滤，将滤液减压蒸馏浓缩，然后在温度为60℃～80℃真空条件下干燥，得到白色粉末状产物四聚L‑谷氨酸；三、将50mL～71mL二氯亚砜和110mg～128mg步骤二得到的四聚L‑谷氨酸在室温条件下混合均匀，加热到70℃～90℃，保持1.5h～2h，再加入20mL～30mL无水二甲基亚砜，在减压条件下，蒸馏直到无馏分蒸出为止，然后冷却到室温，再加入20.4mg～29.4mg的L‑谷氨酸，并且继续反应6h～8h，然后加入100mL～200mL二次蒸馏水，控制温度为0℃～4℃过滤，向滤液中加入12mL～16mL醋酸酐，加热至80℃～90℃，控制转速为800转/min～1200转/min，连续搅拌30min～50min，然后在温度为‑20℃条件下保持8h～12h，过滤，将滤液减压蒸馏浓缩，然后在60℃～80℃真空条件下干燥，得到白色粉末状产物六聚L‑谷氨酸；四、将15mL～20mL二氯亚砜和77.5mg～80mg步骤三得到的六聚L‑谷氨酸在室温条件下混合均匀，加热到80℃～90℃保持2h～4h，加入5mL～10mL无水N,N‑二甲基甲酰胺，在减压条件下，除去未反应的二氯亚砜，然后搅拌冷却到室温，加入150mL～200mL的5‑(4‑羟基苯基)‑10,15,20‑三苯基卟啉的N,N‑二甲基甲酰胺溶液，其中5‑(4‑羟基苯基)‑10,15,20‑三苯基卟啉的质量为124.4mg～157.8mg，继续反应4h～6h，并加热到90℃～100℃，回流1.5h，然后搅拌冷却到室温，加入30mL～50mL二次蒸馏水，再加热到90℃～100℃，回流1.5h，搅拌冷却到室温，调节pH值为6.5～7，在减压条件下，除去N,N‑二甲基甲酰胺和水，真空干燥，得到紫红色粉末，然后将紫红色粉末溶解在甲醇和氯仿的混合液中，加载到硅胶柱，进行柱层析，首先以氯仿为淋洗剂，得到第一色谱带，为未完全反应的5‑(4‑羟基苯基)‑10,15,20‑三苯基卟啉，然后以甲醇和氯仿为淋洗剂，收集第二色谱带，然后将其浓缩，真空干燥，得到六聚谷氨酸键联卟啉二聚物；五、将40mg～45mg步骤四制备的六聚谷氨酸键联卟啉二聚物溶解于40mL～45mL的去离子水中，在搅拌的条件下滴加浓度为0.1g/mL的碳酸氢钠水溶液至六聚谷氨酸键联卟啉二聚物水溶液的pH为6.5～7；将10‑羟基喜树碱溶解在生理盐水中制成10‑羟基喜树碱的饱和生理盐水溶液，将10‑羟基喜树碱的饱和生理盐水溶液通过漏斗慢慢滴入六聚谷氨酸键联卟啉二聚物水溶液中，当溶液颜色由蓝紫色变为浅红色即停止滴加10‑羟基喜树碱溶解在生理盐水，然后继续搅拌2h～4h，向溶液中加入40mL～45mL的甲醇，静置24h～48h，即获得10‑羟基喜树碱/卟啉类光敏剂复合制剂。