[发明专利]一种生物源性小口径组织工程血管的制备方法有效
申请号: | 201810067424.8 | 申请日: | 2018-01-23 |
公开(公告)号: | CN108144121B | 公开(公告)日: | 2021-05-14 |
发明(设计)人: | 谷涌泉;王聪;成津 | 申请(专利权)人: | 首都医科大学宣武医院 |
主分类号: | A61L27/36 | 分类号: | A61L27/36;A61L27/50 |
代理公司: | 天津欣达睿诚知识产权代理事务所(普通合伙) 12216 | 代理人: | 李欣 |
地址: | 100053*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及一种生物源性小口径组织工程血管的制备方法,属于组织工程和生物材料领域。一种生物源性小口径组织工程血管的制备方法,包括如下步骤:(1)冻融:将新鲜动物血管放在含有0.02%~0.2%EDTA的PBS缓冲液中,置于‑80℃速冻1~3小时,取出后立刻放置于37℃条件下10~30分钟解冻;重复上述操作2~5次,得到血管材料;(2)去除冻融后脱落的细胞碎片;(3)脱细胞;(4)清除去垢剂。本发明的优点是提供了一种能够脱除血管组织内的细胞成分,并最大程度保护脱细胞基质的结构完整性的脱细胞方法和试剂组合。 | ||
搜索关键词: | 一种 生物 小口径 组织 工程 血管 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种生物源性小口径组织工程血管的制备方法,其特征在于包括如下步骤:(1)冻融:将新鲜动物血管放在含有0.02%~0.2%EDTA的PBS缓冲液中,置于‑80℃速冻1~3小时,取出后立刻放置于37℃条件下10~30分钟解冻;重复上述操作2~5次,得到血管材料;(2)去除冻融后脱落的细胞碎片:将步骤(1)得到的血管材料置于蒸馏水中充分冲洗,除去脱落的细胞残渣;(3)脱细胞:将步骤(2)得到的血管材料浸泡在含有0.02%~0.2%EDTA和1%TritonX‑100的Tris‑HCl缓冲液中在室温下摇振12~48小时,之后用蒸馏水充分清洗去除残留的TritonX‑100;然后将得到的血管组织置于含有0.05%~0.5%的十二烷基硫酸钠(Sodium dodecyl sulfate,SDS)的Tris‑HCl缓冲液中,在室温下摇振60~80小时,得到脱细胞血管基质;(4)清除去垢剂:将步骤(3)得到的脱细胞血管基质在蒸馏水中充分摇晃洗涤,彻底清除残留的脱细胞试剂,后用PBS缓冲液摇振清洗12~36小时,得到脱细胞组织工程血管,消毒后浸于含1%青霉素/链霉素的无菌PBS缓冲液中,置于‑20℃冰箱保存。
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