[发明专利]一种天竺葵的组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明提供了一种天竺葵的组织培养快速繁殖方法，该方法选取生长状态良好的天竺葵的幼嫩叶片做为外植体，将外植体消毒后，切掉叶缘和叶脉接种到愈伤诱导培养基诱导愈伤组织，将诱导出的愈伤组织转移到分化培养基中诱导芽的产生，将诱导出的有效的植株接种到生根培养基中进行生根培养，待植株生根完成长成完整的植株后，对植株进行炼苗、移栽。本发明通过对天竺葵的幼嫩叶片进行组织培养获得了天竺葵幼苗，该方法材料易得，消毒方便，愈伤诱导成功率高，愈伤组织分化后得苗率高，虽然在试验周期上比直接扦插稍长，但是在植株繁殖效率上远高于扦插，并且能较好地保持天竺葵的品系优势，能够快速繁殖出大量适合移栽的天竺葵幼苗。

主权项

1. 一种天竺葵的组织培养快速繁殖方法，其特征在于，步骤包括：（1）外植体的选择与消毒选取表面清洁的天竺葵幼嫩叶片为外植体，首先用75%乙醇震荡浸泡1min，然后在超净工作台上用含5%有效氯的次氯酸钠溶液浸泡灭菌5～8min，最后用无菌水冲洗4～5次，每次冲洗1min，得到无菌外植体；（2）愈伤组织的诱导将步骤（1）无菌外植体按0.5*0.5cm切块，除去叶缘和叶脉后，首先在叶片的背面切1～2个伤口，然后使叶片背面向下接种在诱导愈伤培养基上，25℃暗培养一周后，再按照“光培养16h-暗培养8h”的周期，培养2～3周，得到愈伤组织；（3）分化培养基诱导得到植株将步骤（2）诱导出的愈伤组织转移到分化培养基FH1中诱导产生幼芽，按照“光培养16h-暗培养8h”的周期，在25℃下培养，首先培养10天分化出幼芽，再继续培养3～4周，当愈伤组织分化产生大量的幼芽后，接种到分化培养基FH2中，按照“光培养16h-暗培养8h”的周期，在25℃下培养3~4周，诱导幼芽生成叶片，长成完整的植株；（4）诱导出的幼小植株生根分离步骤（3）分化培养基诱导得到的植株，然后转移到生根培养基中，按照“光培养16h-暗培养8h”的周期，25℃下在组培瓶中培养4周，得到带有根的完整的植株；（5）炼苗与移栽将步骤（4）中的组培瓶瓶盖打开，瓶口覆保鲜膜炼苗2天，植株取出后，冲洗干净根上残留的培养基，移栽至基质中，置于阴凉通风处，温度保持18～25℃，移栽第一周每天早晚各喷水一次，保持植株生长环境的湿度。