[发明专利]一种脂肪来源的脂肪干细胞的分离扩增方法及其应用在审
| 申请号： | 201711490601.5 | 申请日： | 2017-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN109988747A | 公开（公告）日： | 2019-07-09 |
| 发明（设计）人： | 刘建强;何晓;艾霞 | 申请（专利权）人： | 西安洛威塔生物科技有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775;A61L27/38 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 710000 陕西省西安市高新*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种脂肪来源的脂肪干细胞的分离扩增方法，包括脂肪组织选取、酶消化法从脂肪组织中获得脂肪干细胞、扩增脂肪干细胞等步骤，本发明提供的脂肪干细胞的分离扩增方法细胞扩增速度快、在规定的细胞繁殖代数内，可以得到浓度为1×106细胞/ml的脂肪干细胞，并提供一种应用该脂肪干细胞用于丰胸的脂肪注射液，可有效解决单纯脂肪注射时，出现的脂肪液化、坏死等并发症。 | ||
| 搜索关键词： | 脂肪干细胞 扩增 脂肪来源 脂肪组织 酶消化法 细胞繁殖 细胞扩增 有效解决 脂肪液化 脂肪注射 注射液 代数 丰胸 坏死 并发症 应用 脂肪 细胞 | ||
【主权项】：
1.一种脂肪来源的脂肪干细胞的分离扩增方法，其特征在于，包括如下步骤：脂肪组织选取：在无菌条件下从大腿内侧或腹部抽取脂肪组织20～30ml；酶消化法从脂肪组织中获得脂肪干细胞：在超净工作台无菌环境下，在抽取的脂肪组织中，加入两倍体积的1～5mg/mL I型胶原蛋白酶，37度下消化1h，将消化液在800转离心下，离心5分钟，弃上清液，用含有EGF、bFGF及PRP的DMEM/F12培养基重悬细胞；扩增脂肪干细胞：在DMEM/F12培养基中加入表皮细胞生长因子（EGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）及富含血小板的血浆（PRP），在35～37℃、浓度1～5%二氧化碳培养箱中培养脂肪干细胞，所述碱性细胞生长因子的浓度为：EGF活力单位为50～200U/mL，bFGF活力单位为100～500U/mL，所述富含血小板的血浆，是自体全血经离心后得到的血小板浓缩物，将其加入DMEM/F12培养基中，其血浆最终浓度为5～20%。
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