[发明专利]一种远程采样水稻籽粒碳代谢关键酶活性检测方法在审
| 申请号： | 201711473121.8 | 申请日： | 2017-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN108195646A | 公开（公告）日： | 2018-06-22 |
| 发明（设计）人： | 郭龙珠;吕纯波;周光涛;郭龙胜;朱伟峰 | 申请（专利权）人： | 河海大学 |
| 主分类号： | G01N1/28 | 分类号： | G01N1/28;G01N1/42;G01N33/10 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 楼高潮 |
| 地址： | 211100 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本申请公开了一种远程采样水稻籽粒碳代谢关键酶活性检测方法，采用液氮保存、保温瓶运输，实验室籽粒带壳磨样、改进方法检测、数据还原；本申请方法能提高远距离水稻分子酶活测定研究的准确性和精度；由于采取了籽粒带壳测定酶活性，适用于碳代谢和氮代谢酶活检测的采样，使灌溉机理实验不再局限于近距离取样；拓展了远距离试验区的研究，应用前景较广。 | ||
| 搜索关键词： | 碳代谢 采样 关键酶活性 水稻籽粒 远距离 籽粒 带壳 检测 保温瓶 测定酶活性 机理实验 酶活测定 酶活检测 数据还原 液氮保存 氮代谢 近距离 试验区 磨样 取样 申请 灌溉 水稻 局限 研究 拓展 运输 应用 改进 | ||
【主权项】：
1.一种远程采样水稻籽粒碳代谢关键酶活性检测方法，其特征在于，包括如下步骤：第一步：在抽穗期，选取生长整齐一致且同日抽穗的稻穗挂牌标记，采样时间为抽穗后10天、17天和25天；第二步：现场采样后将籽粒装入冻存管用液氮冷冻处理后，运输至目的地后保存于‑20℃~‑80℃冰柜中；第三步：取样品籽粒15粒，带壳带胚，称量0.2‑0.4g，在预冻的研钵中先加入冷冻的籽粒研磨，研磨完全后在研钵中分两次每次3mL加入缓冲液，第二次将研钵冲洗干净得研磨液；第四步：研磨液在冷冻离心机离心后取上清液用于酶活性测定，所述上清液为粗酶液；第五步：通过碳代谢关键酶活力计算公式对粗酶液进行ADPG焦磷酸化酶活性测定和可溶性淀粉合成酶活性测定。
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