[发明专利]一种通过昆虫体壁渗透dsRNA干扰昆虫基因表达的方法

摘要

本发明涉及纳米材料与基因干扰领域，具体公开了一种通过昆虫体壁渗透dsRNA干扰昆虫基因表达的方法，将纳米载体与dsRNA功能大分子络合，借助表面活性剂的作用，实现外源dsRNA分子在昆虫体表附着、展布、渗透体壁并进入体内各种器官组织，高效干扰基因表达。本发明借助纳米载体和表面活性剂的双重增效作用，实现外源dsRNA分子高效、无创导入虫体细胞内，最终促进dsRNA分子正确靶向，提升RNA干扰效率。本发明所述方法简单、高效、误差小，对昆虫基因干扰科学研究工作和高效安全、靶向型RNA农药制剂的应用具有重要的实际意义。 1

主权项

1.一种通过昆虫体壁渗透dsRNA干扰昆虫基因表达的方法，其特征在于，将纳米载体与dsRNA功能大分子络合，借助表面活性剂的作用，实现外源dsRNA分子在昆虫体表附着、展布、渗透体壁并进入体内各种器官组织，高效干扰基因表达。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

1)将纳米载体溶液、dsRNA溶液与表面活性剂混合，得到复合体药液；

2)将所述复合体药液置于昆虫体表。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在步骤1)中，所述纳米载体溶液中的纳米载体与所述dsRNA溶液中的dsRNA按照电荷比为1:8～8:1的比例混合得到混合液，将所述表面活性剂与所述混合液按照0.01％～10.0％的体积比混合。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述纳米载体与所述dsRNA按照电荷比1:1的比例混合得到混合液，将所述表面活性剂与所述混合液按照1％的体积比混合。

5.根据权利要求1～4任一项所述的方法，其特征在于，所述纳米载体为内部具有空腔结构，且表面携带正电荷的纳米载体。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述纳米载体为具有高密度亲水性官能团的纳米载体。

7.根据权利要求2～4任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤2)具体可通过滴加法、喷雾法或浸泡法将所述复合体药液加到昆虫体表。

8.一种用于干扰昆虫基因表达的复合体药液，其特征在于，由纳米载体溶液、dsRNA溶液与表面活性剂混合而成。

9.权利要求8所述的复合体药液在通过昆虫体壁渗透dsRNA干扰昆虫基因表达中的应用。