[发明专利]NOK基因及其表达产物在构建慢性B淋巴细胞白血病动物模型中的用途

摘要

本申请涉及NOK基因及其表达产物在构建慢性B淋巴细胞白血病动物模型中的用途。本发明人的研究表明：来源于人12号染色体的基因NOK，可诱导NOK转基因小鼠(NOK‑tg)自发地产生慢性淋B淋巴细胞白血病(B‑CLL)。在外周淋巴器官中常可检测到了CD5+CD19+B细胞的扩增，且伴随着记忆性B淋巴细胞的扩增。尽管NOK‑tg鼠间常存在免疫表型的异质性，但骨髓的检测发现B淋巴细胞早期发育常呈现显著的抑制。重要的是，骨髓分析结果表明NOK诱发的慢性B淋巴细胞白血病可能始于B淋巴细胞定向分化前的原始阶段。因此，NOK基因表达的遗传改变很大程度上诱使造血干细胞向B‑CLL方向发展。 1

主权项

1.NOK基因及其表达产物在构建慢性B淋巴细胞白血病动物模型中的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，其中：

所述的慢性淋巴细胞白血病是慢性B淋巴细胞白血病；

优选，突变型慢性B淋巴细胞白血病、或未突变型慢性B淋巴细胞白血病。

3.根据权利要求1所述的用途，其中所述的动物是除了人以外的哺乳动物，其选自小鼠、大鼠、豚鼠、兔、牛、羊、马、骆驼、猪、犬、猫、猴、猿；

优选地，所述的动物是小鼠。

4.根据权利要求3所述的用途，所述的动物模型显示选自以下的任一项或组合：体重减轻、疲劳、瘙痒、皮肤出血点、脏器肿大、脏器肿瘤细胞浸润；

所述的脏器选自：肝脏、脾脏、肾脏、肺、淋巴结、外周血、骨髓或其组合。

5.根据权利要求1所述的用途，其中所述的表达产物选自：mRNA或其互补序列、cDNA或其互补序列、NOK成熟蛋白、NOK的前体蛋白、或上述任一项的片段、突变体、衍生物或修饰产物；

所述的修饰选自：磷酸化、糖基化,乙酰化，聚乙二醇化、或其组合。

6.根据权利要求1所述的用途，其中所述的NOK基因是Genbank登录号KP729000.1所示。

7.一种构建慢性B淋巴细胞白血病动物模型的方法，包括：

1)提供表达NOK的表达载体，

2)将所述表达载体引入动物的卵母细胞，优选通过显微注射引入；

3)将注射有所述表达载体的所述卵母细胞转移至假孕动物进行生长；

4)假孕动物生产得到NOK的转基因动物；

所述的动物模型显示选自以下的任一项或组合：体重减轻、疲劳、瘙痒、皮肤出血点、脏器肿大、脏器肿瘤细胞浸润；

所述的脏器选自：肝脏、脾脏、肾脏、肺、淋巴结、外周血、骨髓或其组合。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述的慢性淋巴细胞白血病是慢性B淋巴细胞白血病；优选突变型慢性B淋巴细胞白血病、或未突变型慢性B淋巴细胞白血病。

9.根据权利要求7所述的方法，其中所述的动物是除了人以外的哺乳动物，其选自小鼠、大鼠、豚鼠、兔、牛、羊、马、骆驼、猪、犬、猫、猴、猿；

优选地，所述的动物是小鼠。

10.一种构建慢性B淋巴细胞白血病小鼠动物模型的方法，包括：

1)提供表达人NOK的表达载体，

2)将所述表达载体引入小鼠的卵母细胞，优选通过显微注射引入；

3)将注射有所述表达载体的所述卵母细胞转移至假孕小鼠进行生长；

4)假孕小鼠生产得到NOK的转基因小鼠；

任选地，所述转基因小鼠还包括其表达人NOK的后代。