[发明专利]一种基于干涉光谱分析的有机磷检测方法

摘要

一种基于干涉光谱分析的有机磷检测方法，本发明属于分析化学检测和光纤生物传感器技术领域，涉及一种通过修饰光纤生物传感器实现对样品溶液中有机磷的检测方法，其特征为由水溶性碳二亚胺法制备有机磷通用半抗原后再分别与牛血清白蛋白和鸡卵清白蛋白偶联，所得偶联物对光纤生物传感器进行修饰后，用以测定样品溶液中有机磷含量。该检测方法简单方便，检测周期短，响应时间快，稳定性好且具有高灵敏等优点，修饰探头可再生重复使用，因而检测成本较低，有望进行大规模的推广应用。

主权项

一种基于干涉光谱分析的有机磷检测方法其特征在于：包括下列步骤：第一步：包被原偶联物的合成将4‑羟基苯甲酸溶于含有KOH的甲醇中，搅拌下逐滴加入二乙氧基硫代磷酰氯，然后升温至60~70℃，搅拌使体系反应，然后将反应物浓缩，得到的粗产物溶解于乙酸乙酯中，接着用NaOH水溶液萃取，水相用盐酸酸化至析出沉淀，水洗得到半抗原，然后将所述半抗原溶于二甲基甲酰胺中，再在搅拌条件下，加入N,N'‑二环己基碳二亚胺和N‑羟基琥珀酰亚胺，搅拌条件下反应过液，离心后得到的上清液记作A液；将牛血清蛋白溶于pH值为8.0的PBS缓冲液中，搅拌溶解得B液；磁力搅拌下，将A液逐滴加入B液中，4℃下反应12h，离心取上清液，4℃下用生理盐水透析3d，每天更换3次透析液，获得免疫原；第二步：免疫原的合成将对氨基苯酚溶于无水吡啶得对氨基苯酚溶液，顺丁烯二酸酐溶于无水吡啶得顺丁烯二酸酐溶液，然后将对氨基苯酚溶液滴加至顺丁烯二酸酐溶液中，反应结束后加入饱和碳酸钾溶液，接着用乙酸乙酯萃取，水层用盐酸将pH值调至2.0，析出草绿色固体，用蒸馏水洗，干燥后得到4‑(4‑羟苯胺基)‑4‑氧代‑2‑丁烯酸，将4‑(4‑羟苯胺基)‑4‑氧代‑2‑丁烯酸溶于二甲基甲酰胺中，再在搅拌条件下，加入N,N'‑二环己基碳二亚胺和N‑羟基琥珀酰亚胺，搅拌条件下反应过液，离心后得到的上清液记作C液；将鸡卵清白蛋白溶于pH值为8.0的PBS缓冲液中，搅拌溶解得D液；磁力搅拌下，将C液逐滴加入D液中，4℃下反应12h，离心取上清液，4℃下用生理盐水透析3d，每天更换3次透析液，获得包被原；第三步：光纤生物传感器探头修饰将APS光纤传感器末端没入包被原溶液中，室温静置4~6min，再将APS光纤传感器末端没入蔗糖溶液中，晾干后置于2～8℃干燥的环境中保存；包被原溶液的浓度为2mg/L；第四步：平衡：将所述APS光纤传感器末端没入阴性待检液体120s，所述阴性待检液体中含有200μL待检液体、50μL缓冲液；检测：将所述APS光纤传感器末端没入待测液体中300s，所述待测液体含有200μL待测样品+50μL缓冲液+2μg有机磷农药通用抗体。