[发明专利]一种基于光学生物传感器的沙丁胺醇检测方法

摘要

本发明公开了一种基于光学生物传感器的沙丁胺醇检测方法，可适用于猪肉及组织中沙丁胺醇含量的检测，包括重氮法氨基化小分子抗原制备、包被抗原修饰光纤探头、以及利用多模干涉效应检测和识别待测生物样本中是否存在目标物以及浓度信息的具体步骤。本发明的优点是能准确灵敏地检测猪肉及组织中的沙丁胺醇残留，样品的前处理过程简单，耗时少，能同时检测大量的样品，样品检测成本远低于传统的仪器检测方法。

主权项

一种基于光学生物传感器的沙丁胺醇检测方法，其特征在于：包括下列步骤：第一步：将对氨基苯甲酸溶入盐酸中得到对氨基苯甲酸溶液，然后将亚硝酸钠溶液逐滴加入到对氨基苯甲酸溶液中，避光反应得到A溶液；第二步：将硫酸沙丁胺醇溶在冰冷的硼砂缓冲液中，接着将所述A溶液逐滴加入，避光反应得到桔黄色溶液B；然后加入硼酸晶体并调pH值至7.4，接下来加入阳离子化牛血清白蛋白，同时加入1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐、N‑N‑羟基琥珀酰亚胺，室温搅拌得桔黄色溶液C；溶液C用pH值为7.4的PBS缓冲液透析，得到包被原；第三步：将硫酸沙丁胺醇溶在冰冷的硼砂缓冲液中，接着将所述A溶液逐滴加入，避光反应得到桔黄色溶液D；然后加入硼酸晶体并调pH值至7.4，然后加入鸡卵清蛋白，同时加入加入1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐、N‑N‑羟基琥珀酰亚胺，室温搅拌得桔黄色溶液E，溶液E用pH值为7.4的PBS缓冲液透析，得到免疫原；第四步：将光纤传感器末端没入1 mg/L的包被原溶液中，室温静置5 min后再将其置于质量分数为15%的蔗糖溶液中，室温静置1 min后取出晾干，2～8℃的干燥条件下保存、备用；第五步：选取猪肉样本的肌肉部分，去除油脂和筋膜，用刀切细，用绞肉机绞碎成糜状，加体积分数为70%的甲醇溶液后振荡3分钟，用滤纸过滤，若滤液澄清则可直接用光纤传感器没入滤液来测定；如果滤液浑浊，则将滤液以3000rpm离心5min，用光纤传感器没入滤液澄清上清液进行测定。