[发明专利]一种培养基套盒及其在单叶蔓荆离体快速繁殖中的应用

摘要

本发明公开了一种培养基套盒及其在单叶蔓荆离体快速繁殖中的应用。本发明培养基套盒包括用于建立无菌体系的培养基、用于丛芽诱导与增殖的培养基、用于不定芽诱导的培养基、用于不定芽伸长诱导的培养基、用于生根的培养基，以及体积比为3：1的黄泥和泥炭土混合而成的基质。本发明首次发现带芽茎段扁平化诱导的不定芽发生途径并通过本发明培养基套盒进行单叶蔓荆的离体培养，丛芽繁殖倍率最高可达21.9、平均每个扁平化外植体的不定芽发生数量最高达84.9个、不定芽伸长可达3.0cm、生根率与平均生根数分别可达70.5％与86.4、移栽30天后成活率最高可达86％，具有良好的应用前景。

主权项

1.一种促进单叶蔓荆离体快速繁殖的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)选取单叶蔓荆半木质化幼苗带腋芽茎段为外植体；(2)在无菌条件下，将外植体用升汞消毒后接种于用于建立无菌体系的培养基上，获得无菌苗；(3)将步骤(2)获得的无菌苗剪切为带1个节的带芽茎段，接种于用于丛芽诱导与增殖的培养基上，获得丛芽；(4)将步骤(3)获得的丛芽剪切为带1个节的茎段，接种于用于不定芽诱导的培养基上，诱导茎段扁平化，获得不定芽；(5)将步骤(4)获得的不定芽接种于用于不定芽伸长诱导的培养基上，获得伸长为常态芽的不定芽；(6)将步骤(5)获得的伸长为常态芽的不定芽接种于用于生根的培养基上，进行生根培养，得到组培苗，将其根部培养基清洗干净，移栽于体积比为3：1的黄泥土和泥炭土混合而成的基质上，完成单叶蔓荆的离体快速繁殖；所述的用于建立无菌体系的培养基，其是以MS培养基为基础培养基，添加了25～35g/L蔗糖和6.5～7.5g/L琼脂；所述的用于丛芽诱导与增殖的培养基，其是以用于建立无菌体系的培养基为基础培养基，添加了0.5～2.5mg/L6‑苄基腺嘌呤；所述的用于不定芽诱导的培养基，其是以用于建立无菌体系的培养基为基础培养基，添加了2.5mg/L6‑苄基腺嘌呤；所述的用于不定芽伸长诱导的培养基，其是以用于建立无菌体系的培养基为基础培养基，添加了1.5～2.5mg/L萘乙酸；所述的用于生根的培养基，其是以1/2MS培养基为基础培养基，添加了3.0mg/L吲哚丁酸、2.0～3.0mg/L萘乙酸、25～35g/L蔗糖和6.5～7.5g/L琼脂；步骤(2)～(6)中的培养条件均为：25±1℃、光照时间12h/12h L/D、光照强度1500～2000lx。