[发明专利]一种基于亲和层析柱的乌司他丁纯化方法

摘要

本发明公开了一种对尿液进行预处理并结合亲和层析柱对乌司他丁进行纯化方法，该方法包括以下步骤：对尿液进行冷冻、真空及微波预处理得乌司他丁粗品，然后通过疏水柱层析、亲和层析和凝胶过滤层析对乌司他丁粗品进行纯化，最后洗涤、冻干得到总收率在90％以上，总效价6700iu/mg以上的乌司他丁，对尿液进行一定程度的预处理，结合使用层析柱纯化处理，操作简单，且优选的填料和流速等参数提高了生产效率，大大降低生产成本，适合进一步开发利用。

主权项

1.一种基于亲和层析柱的乌司他丁纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取适量pH为4-6.5的澄清尿液，首先在氮气保护下对其进行的冷冻真空处理，在真空条件下进行微波处理，然后离心浓缩，收集浓缩尿液中加入适量壳聚糖，并用精密pH试纸调节尿液pH为4.5-6.5；吸附完全后用氨水洗脱0.5-3h,在经过2-5kg硫酸铵盐析，静置、沉淀、干燥后即得乌司他丁粗品；(2)对步骤(1)得到的乌司他丁粗品进行层析柱纯化；(3)将步骤(2)得到的层析洗脱液依次进行微滤、超滤；(4)将步骤(3)得到的超滤液离心，弃上清，将沉淀用无水乙醇洗涤，留取沉淀物；(5)将步骤(4)得到的沉淀物冻干，即得乌司他丁。