[发明专利]一种NF2-/-

摘要

本发明公开了人NF2‑/‑前庭神经鞘瘤施旺细胞系的建立方法及其细胞系。该建立方法包括：A、对肿瘤中的施万细胞(Schwann cel l)进行分离，获得人NF2‑/‑的原代施万细胞(human NF2‑/‑Schwann cel l)进行原代培养；B、建立免疫缺陷小鼠坐骨神经人NF2‑/‑原代施万细胞移植瘤模型；C、从小鼠坐骨神经上筛选直径大于1cm的移植瘤；D、分离施万细胞，进行原代细胞培养；E、进行连续5代以上传代培养；F、在筛选获得与人NF2‑/‑的原代施万细胞、移植瘤原代细胞株细胞形态及主要生物学特征一致，并且能无限传代的NF2‑/‑前庭神经施旺细胞。该细胞有95％以上的成功率长出移植瘤。

主权项

1.一种NF2‑/‑前庭神经施旺细胞系的建立方法，其特征在于，包括：A.在手术中获得2型神经纤维瘤病(NF2)患者的前庭神经鞘瘤标本，分离获得人NF2‑/‑的原代施万细胞(human NF2‑/‑Schwann cell)。B.使用加入10％胎牛血清以及生长因子的advance DMEM/F12培养基，对人NF2‑/‑前庭神经鞘瘤施万细胞进行原代培养；C.在多只BALB/c免疫缺陷小鼠坐骨神经上，接种在步骤B获得的原代施万细胞，建立坐骨神经移植瘤模型；D.接种肿瘤28‑42天后的小鼠中，筛选肿瘤直径大于1cm的移植瘤，进行细胞分离，筛选出施万细胞进行鉴定；E.使用加入10％胎牛血清以及生长因子的advance DMEM/F12培养基，对步骤D中取得并完成鉴定的移植瘤施万细胞，重新进行原代培养；F.在所述移植瘤细胞生长速度稳定后，换用加入10％胎牛血清的advance DMEM/F12培养基进行连续传代培养；G.在连续传代培养过程中，筛选获得与人NF2‑/‑前庭神经鞘瘤、移植瘤原代细胞株细胞形态及主要生物学特征一致，并且能无限传代的人NF2‑/‑前庭神经瘤施旺细胞系。H.利用这细胞系重新植入BALB/c免疫缺陷小鼠的坐骨神经上建立移植瘤模型，成功率在95％以上，可有效用于NF2神经鞘瘤的生物学研究。