[发明专利]一种南瓜子的高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱

摘要

一种南瓜子的高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱，涉及一种南瓜子指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱。本发明的目的是提供一种南瓜子的高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱。本发明方法为：一、制备供试品溶液；二、制作指纹图谱，将供试品溶液注入高效液相色谱仪；本发明南瓜子的指纹图谱有15个共有特征峰，这些共有特征峰构成了南瓜子的指纹特征，可作为南瓜子的标准指纹图谱。本发明具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好、易于实现的特点。本发明南瓜子标准指纹图谱的用途是指南瓜子指纹图谱作为标准指纹图谱用于南瓜子药材的真伪、产地和品质的鉴别和质量控制。本发明应用于医药领域。

主权项

1.一种南瓜子的高效液相色谱指纹图谱的建立方法，其特征在于该方法包括以下步骤：一、供试品溶液的制备：a、取南瓜子药材，粉碎后加入10倍量的石油醚，回流3次，每次2～3h；将残渣晾干后，加入10倍量的质量百分浓度为95％的乙醇，回流2次，每次2～4h，合并每次所得溶液，过滤，减压浓缩至干，得浸膏；b、将浸膏用少量蒸馏水溶解后上到大孔树脂色谱柱上，先用蒸馏水洗涤4个柱体积，再用质量浓度为30％的乙醇洗脱4个柱体积，收集洗脱液，然后减压浓缩洗脱液至干，得到干燥固体C；c、将步骤b得到的干燥固体C，用色谱甲醇溶解成浓度为1～2mg/mL的溶液，用微孔滤膜进行过滤，滤液即为供试品溶液；二、指纹图谱的制作：将步骤一得到的供试品溶液注入高效液相色谱仪，以体积比为1:1的甲醇和乙腈的混合溶液为A相，以体积比为0.2:(100～105)的磷酸和水的混合液为B相进行梯度洗脱；其中，高效液相色谱条件为：色谱柱填料Thermo C18，规格为250×4.6mm，5μm；柱温为35℃；流速0.8mL/min，检测波长264nm，进样量10μL；在此条件下分析供试品溶液，得到南瓜子的指纹图谱；步骤二中梯度洗脱顺序为：0min→22min→50min→60min→75min，体积比为1:1的甲醇和乙腈混合溶液1％→15％→20％→22％→25％。