[发明专利]一种基于免疫磁性纳米材料光热效应的鼠伤寒沙门氏菌快速检测方法

摘要

本发明建立了一种基于免疫磁性纳米材料光热效应的鼠伤寒沙门氏菌快速检测方法，利用免疫磁性纳米材料的光热效应建立了温度升高值与鼠伤寒沙门氏菌数目间的标准曲线，可将样品产生的温度升高值带入标准曲线得到样品中的细菌数目。同时，利用免疫磁性纳米材料的磁性与光热效应，实现了富集分离‑检测‑试样灭活三个环节的有效整合，本方法灵敏、安全、快速、便携、成本低，经实验验证，基于免疫磁性纳米材料光热效应的鼠伤寒沙门氏菌方法最低检测限为300个细菌，且温度升高值ΔT与细菌数目在300～1000范围内成线性相关关系，因此本发明具有良好的实际应用前景，可应用于对鼠伤寒沙门氏菌的实际快速检测。

主权项

1.一种基于免疫磁性纳米材料光热效应的鼠伤寒沙门氏菌快速检测方法，其特征在于，包括：S1.将羧基磁珠与抗鼠伤寒沙门氏菌抗体偶联得免疫磁性纳米材料；步骤S1.免疫磁性纳米材料具体制备方法为：S1.1取粒径为200～300nm的羧基磁珠，超声，磁分离，用双蒸水清洗；向其中加入EDC/NHS溶液，在室温条件下活化，再进行磁分离，用PBS溶液反复清洗后得活化后磁珠；S1.2向活化后的磁珠中加入抗鼠伤寒沙门氏菌抗体，室温条件下反应一段时间，磁分离，然后用PBS溶液反复清洗，得免疫磁性纳米材料；S2.将步骤S1.制备得到的免疫磁性纳米材料添加至鼠伤寒沙门氏菌中，孵育，膜过滤，并用磁分离技术进一步纯化，得鼠伤寒沙门氏菌‑免疫磁性纳米材料复合物；步骤S2.中免疫磁性纳米材料的添加量为9～10μg/1000个鼠伤寒沙门氏菌；S3.用激光对截留在膜上的鼠伤寒沙门氏菌‑免疫磁性纳米材料复合物照射，产生温度变化，根据温度升高值和细菌数目建立标准曲线；同时基于免疫磁性纳米材料的光热效应，同步对鼠伤寒沙门氏菌进行灭活；步骤S3.中激光功率为2.5～2.8W·cm^‑2，波长为808nm，照射时间为2～5分钟。