[发明专利]一种利用单片段置换系聚合改良水稻抽穗扬花期及灌浆期耐热性的分子育种方法

摘要

本发明属于分子育种领域，涉及一种培育水稻抽穗扬花期及灌浆期耐热性新品种的分子育种方法。该方法是以保藏号为CGMCC NO.12532的中籼两系骨干恢复系9311为母本，保藏号为CGMCC NO.12534和CGMCC NO.12535的元江普通野生稻单片段置换系YJ07‑04‑06和YJ01‑05‑03杂交得到的F₁为亲本，互交1代，与轮回亲本回交3代，再自交3代获得稳定纯合株系BC₃F₄，每代都是单穗收获；再以分子标记辅助选择结合人工气候室模拟高温胁迫鉴定获得水稻新品系。利用这一方法，已经培育出水稻抽穗扬花期及灌浆期都显著耐热的新品系“元野3号”。通过分子标记辅助选择目标性状，可在3‑4年内快速高效培育出抽穗扬花期及灌浆期耐热恢复系。

主权项

1.一种利用单片段置换系聚合改良水稻抽穗扬花期及灌浆期耐热性的分子育种方法，包括：以保藏号为CGMCC NO.12532的中籼两系骨干恢复系9311为母本，保藏号为CGMCC NO.12534和CGMCC NO.12535的元江普通野生稻单片段置换系YJ07‑04‑06和YJ01‑05‑03杂交得到的F1为父本，杂交1代，回交3代，再自交3代获得稳定纯合株系BC3F4，每代都是单穗收获；1)种植BC1F1，应用SDS法提取DNA，采用所述的元江野生稻(荷花塘3号)染色体单片段置换系YJ07‑04‑06对应的分子标记引物对RM6515和RM8069(表1)进行PCR扩增，选择同时含有上述4个来源于元江普通野生稻的分子标记条带，分子量分别是404bp和184bp的单株与轮回亲本9311回交，种子按单株收获；其中分子标记引物对RM3394正/反向序列为SEQ ID NO.1/SEQ ID NO.2，RM6223正/反向序列为SEQ ID NO.3/SEQ ID NO.4；RM6515正/反向序列为SEQ ID NO.5/SEQ ID NO.6；RM8069正/反向序列为SEQ ID NO.7/SEQ ID NO.8；表1 引物特征带大小及序列1)分子标记辅助第二次选择：种植BC2F1，每株提取DNA后，再利用所述的分子标记引物对确定BC1F1单株的基因型，同时具有2个来源于上述野生稻的分子标记条带，分子量分别是404bp(RM3394)；184bp(RM6223)；224bp(RM6515)和392bp(RM8069)的单株继续与轮回亲本9311回交；2)分子标记辅助第三次选择：种植BC3F1，每株提取DNA后，继续利用所述的分子标记引物对确定BC3F1单株的基因型，同时具有4个来源于上述元江普通野生稻的分子标记条带，分子量分别是404bp(RM3394)；184bp(RM6223)；224bp(RM6515)和392bp(RM8069)的单株自交，按单穗收获种子；3)分子标记辅助第四次选择：种植BC3F2，每株提取DNA后，继续利用所述的分子标记引物对确定BC3F2单株的基因型，同时具有4个来源于上述元江普通野生稻的分子标记条带，分子量分别是404bp(RM3394)；184bp(RM6223)；224bp(RM6515)和392bp(RM8069)的单株自交获得BC3F3，按单穗收获种子。