[发明专利]胎盘提取物及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种胎盘提取物及其制备方法和应用，其是将胎盘组织经冷冻处理，提取有效成分，再将有效成分进行纯化后得到的。本发明的胎盘提取物的活性成分经多步技术纯化制得，不仅保留了胎盘中的胶原、多肽、多种生长因子等有效成分，并且不含有细胞成分，避免了细胞制剂的安全性和免疫排斥问题，操作方法简单可控，能够简单实现大规模制备，货架式推广，时间短，无制备周期；可以制成生物凝胶制剂，促进卵巢早衰患者的卵巢功能重建，具有很好的治疗卵巢早衰的效果，其活性成分为人体天然成分，无需口服激素治疗，无激素依赖性，采用粘膜透皮吸收，吸收充分，与口服激素相比安全性更好。

主权项

一种胎盘提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)、将充分清洗、并去除血管和粘膜组织的新鲜健康胎盘组织置于20‑80mmoL/L的pH2.0‑6.0的乙酸‑乙酸钠缓冲液中匀浆，将匀浆液置于4℃水浴中保温1‑4小时，期间不时搅拌，恢复至室温后冷冻离心，得到沉淀和上清；(2)、于4℃，向步骤(1)中的上清缓慢滴加4‑12倍上清体积的‑20℃预冷的乙醇，滴加过程中不断搅拌，冷冻离心，取上清；(3)、旋转蒸发将步骤(2)的上清蒸发，得到蛋黄色粘稠物，用生理盐水将淡黄色粘稠物溶解，离心，取上清；(4)、向步骤(1)中的沉淀加入3‑5倍重量的去离子水，搅拌，调pH7.0‑9.0，加入0.01‑20％胰蛋白酶，水解6‑8小时，冷冻离心后取上清，与步骤(3)中的上清混合，即为胎盘提取物粗制品；(5)、用0.1‑0.5μm滤膜过滤步骤(4)的胎盘提取物粗制品，DE‑52阴离子交换层析，收集所有活性峰，经HPLC进一步纯化后，生理盐水配制，即得胎盘提取物。