[发明专利]一种黄石斛种苗组织培养快速繁殖方法

摘要

一种黄石斛种苗组织培养快速繁殖方法，包括材料选择和处理、外植体消毒、不定芽诱导和增殖、生根壮苗培养和步骤。在不定芽诱导和增殖步骤将丛生芽切割成单个芽，然后接种到生根壮苗培养基上进行培养，得到完整植株；不定芽诱导和增殖培养为在改良MS的基础上添加3.0‑5.0毫克/升6‑苄基腺嘌呤、3.0‑5.0毫克/升激动素、1.0‑2.0毫克/升萘乙酸和10‑20%的椰子汁；生根壮苗培养基为改进MS培养基，在改进MS的基础上添加0.5‑1.0毫克/升的萘乙酸、0.5‑1.0毫克/升的吲哚丁酸、50‑150克/升的香蕉汁、0.5‑1.0克/升的活性炭，改进MS培养基为1/2 MS。本发明采用一年生嫩芽进行组织培养繁殖，具有繁殖速度快、种苗品质优良、后代性状统一等特点，只需要简单的组织培养设备就可以完成。

主权项

一种黄石斛种苗组织培养快速繁殖方法，其特征在于：包括下列步骤：第一步：在超净工作台上，将外植体切除叶片后用酒精浸泡，然后用升汞溶液消毒，再用无菌水冲洗，接下来再用升汞溶液消毒，然后再用无菌水冲洗；然后接种到外植体培养基上；其中：所述外植体培养基为改良MS培养基，在改良MS培养基的基础上添加3.0‑5.0毫克/升6‑苄基腺嘌呤、3.0‑5.0毫克/升激动素、1.0‑2.0毫克/升萘乙酸以及改进MS培养基质量的10‑20%的椰子汁，所述改良MS培养基为大量元素减半的MS培养基；第二步：接种后每隔35‑45天更换所述外植体培养基一次，至第5次时开始将所述外植体培养基中的6‑苄基腺嘌呤和激动素浓度均降至1.5－2.5毫克/升，培养得到丛生芽；第三步：将第二步培养得到的丛生芽切割成单个芽，然后接种到生根壮苗培养基上进行培养，得到完整植株；所述生根壮苗培养基为改进MS培养基，在改进MS培养基的基础上添加0.5‑1.0毫克/升的萘乙酸、0.5‑1.0毫克/升的吲哚丁酸、50‑150克/升的香蕉汁、0.5‑1.0克/升的活性炭，所述改进MS培养基为1/2 MS培养基；第四步：将完整植株转移到具有自然光的温室中炼苗10‑15 天，然后洗净根部的培养基，接下来用苔藓包裹所述完整植株的根系，然后以苔藓为基质种植进行培养。