[发明专利]一种甜瓜花药诱导培养基及花培育种方法

摘要

本发明公开了一种甜瓜花药诱导培养基及花培育种方法，属于果蔬培育种植技术领域。本发明所研发的甜瓜花药诱导培养基含有大量元素、微量元素、铁盐、有机成分、无机添加物、植物生长调节剂、凝固剂及其它添加物等。本发明的甜瓜花培育种方法步骤包括：花蕾取材与预处理、培养基的配制、花药接种、花药诱导培养、花药分化培养、驯化与移栽等。采用本发明对甜瓜花药进行诱导培养，可以有效提高花药愈伤诱导率，大大加快了甜瓜花培育种进程。

主权项

1.一种甜瓜花培育种方法，其特征在于：甜瓜品种为红城10号和龙甜一号，甜瓜花培育种方法按如下步骤操作：（1）花蕾取材与预处理在大田常规栽培的甜瓜处于初花期时，上午9‑11点采集生长健壮、无病虫害的植株上取发育时期处于单核靠边期的花蕾为试材，将采集的花蕾用湿纱布包裹后再用自封塑料袋套起，置于4℃冰箱中低温处理2d，然后转入36℃环境下热激处理2d；（2）培养基的配制将甜瓜花药诱导培养基配制好后分装于250ml的三角瓶中，每瓶盛50ml‑70ml的培养基，密封后置于温度为121℃、压力为15kPa高压蒸汽条件下灭菌20min，冷凝到45‑55℃时，取出置于超净工作台中，无菌操作，加入甲基磺酸乙酯溶液，摇匀冷凝，24h时间内接种；（3）花药接种取出预处理后的花蕾，先用流水冲洗1‑2 min，用镊子剥去花柄，用小块纱布包裹，浸入70%酒精中15s，用无菌水冲洗2‑3次后转入0.1%升汞溶液中消毒8‑10分钟，然后用无菌水冲洗3‑4次，将花蕾放入覆有滤纸的灭菌培养皿内，无菌条件下剥取花药接种到步骤2配制好的诱导培养基上，每瓶接入花药14‑16枚；（4）花药诱导培养将接种花药后的培养基置于温度为26‑28℃、光照强度1400‑1800lx、光周期11h光/13h暗的环境下进行培养，诱导出花药愈伤；（5）花药分化培养待花药愈伤长至直径2.5cm后，挑选半透明、结构松散的愈伤组织转接入分化培养基上进行分化培养，愈伤逐渐分化出绿苗；（6）驯化与移栽花药分化培养35d后绿苗生长旺盛，此时将封口膜打开驯化炼苗，7d后将试管苗取出，将根部清洗干净，移栽入温室，常规栽培；所述甜瓜花药诱导培养基的配方为每升蒸馏水中以下组分含量分别为：KNO3 80‑90mg/L，MgSO4∙7H2O 140‑160mg/L，KH2PO4 70‑76mg/L，Ca(NO3)2∙4H2O 160‑200mg/L，MnSO4∙4H2O 25‑30mg/L，Na2‑EDTA 11‑14mg/L，FeSO4∙7H2O 12‑15mg/L，H3BO38.0‑8.5mg/L，ZnSO4∙7H2O 8.5‑9.5mg/L，KI 0.45‑0.55mg/L，AgNO3 15‑19mg/L，Na2MoO4∙2H2O 0.2‑0.3mg/L，CuSO4∙5H2O 0.02‑0.03mg/L，CoCl2∙6H2O 0.02‑0.03mg/L，腺嘌呤13‑17mg/L，谷氨酰胺 450‑550mg/L，维生素B1 0.9‑1.1mg/L，维生素B6 0.6‑0.8mg/L，Vc 0.55‑0.65mg/L，烟酸 4.5‑5.5mg/L，肌醇 120‑140mg/L，甘氨酸 3.5‑4.5mg/L，胰岛素 1.8‑2.2mg/L，环鸟苷酸 0.15‑0.25g/L，谷胱甘肽 30‑35mg/L，甲基磺酸乙酯 1.0‑1.4g/L，蔗糖 42‑48g/L，琼脂 6.5‑7.5g/L，6‑BA 0.8‑1.2mg/L，NAA 0.8‑1.2mg/L，甘露醇14‑16g/L，椰乳 27‑33g/L，植物硫化激动素PSK‑α 18‑22pmol/L。