[发明专利]高效油脂降解菌的筛选方法在审
| 申请号： | 201710566203.0 | 申请日： | 2017-07-12 |
| 公开（公告）号： | CN107164231A | 公开（公告）日： | 2017-09-15 |
| 发明（设计）人： | 钱轶超;钟宇驰;梁志伟;张丽英;方玥 | 申请（专利权）人： | 浙江桃花源环保科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/02 | 分类号： | C12N1/02;C12N1/36;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 宁波诚源专利事务所有限公司33102 | 代理人： | 景丰强,叶桂萍 |
| 地址： | 310013 浙江省杭州市*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种油脂降解菌的筛选方法，其包括如下步骤⑴接种微生物将含菌污泥水样接种于富集培养基中；⑵培养微生物将步骤⑴中接种后的微生物每3～7天转移培养物至新的富集培养基，持续富集培养20～30天，保证所需微生物菌种的充分生长；⑶驯化微生物将步骤⑵中富集培养后的菌液在25～30℃、150～180rpm摇床的条件下，接种至按梯度递增的含有油脂废水的富集培养基中进行梯度驯化；⑷筛选微生物选取透明圈直径(D)/菌落直径(d)比值大于2的菌株为油脂降解菌，与现有技术相比，本发明具有如下优点本发明的富集培养基中加入了油脂成分橄榄油，且控制pH于7.2‑7.4之间，有利于油脂降解菌的生长和富集，为后续菌种的筛选分离提供了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 高效 油脂 降解 筛选 方法 | ||
【主权项】：
一种高效油脂降解菌的筛选方法，其特征在于：包括如下步骤：⑴接种微生物：将含菌污泥水样接种于富集培养基中，置于25～30℃、150～180rpm的摇床中培养，所述富集培养基的配制组成和重量如下：NaCl 5.0～8.0g，蛋白胨10.0～15.0g，牛肉膏5.0～6.0g，橄榄油6～8mL，蒸馏水1L；⑵培养微生物：将步骤⑴中接种后的微生物每3～7天转移培养物至新的富集培养基，持续富集培养20～30天，保证所需微生物菌种的充分生长；⑶驯化微生物：将步骤⑵中富集培养后的菌液在25～30℃、150～180rpm摇床的条件下，接种至按梯度递增的含有油脂废水的富集培养基中进行梯度驯化，每3～5天作为一个梯度驯化周期，驯化10～20天后得到经驯化处理的微生物；⑷筛选微生物：将步骤⑶中驯化后的微生物菌液按梯度稀释法稀释成不同浓度的悬浮菌液后，均匀涂布于分离培养基中，在25～30℃恒温培养箱中培养24～48h后获得形状不同的单菌落，选取透明圈直径(D)/菌落直径(d)比值大于2的菌株为油脂降解菌，所述分离培养基的配制组成和重量如下：油脂6～8mL，吐温‑80 20～40mL，无机盐培养液1000mL，琼脂18～25g。
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