[发明专利]体外重折叠波形蛋白的方法及其应用有效
| 申请号： | 201710565618.6 | 申请日： | 2017-07-12 |
| 公开（公告）号： | CN107344963B | 公开（公告）日： | 2018-08-24 |
| 发明（设计）人： | 张雁;杨春雨;劳滔滔;林潮喜 | 申请（专利权）人： | 深圳市倍诺博生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/47 | 分类号： | C07K14/47;C07K1/00;G01N21/19;G01N33/68;G01N33/53 |
| 代理公司： | 北京英赛嘉华知识产权代理有限责任公司 11204 | 代理人： | 王达佐;洪欣 |
| 地址： | 518057 广东省深圳市南山*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本申请提供了体外重折叠野生型或突变型波形蛋白的方法、通过该方法制备的野生型或突变型波形蛋白的应用，以及鉴定正确重折叠的波形蛋白的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 波形蛋白 体外重折叠 突变型 野生型 重折叠 制备 应用 申请 | ||
【主权项】：
1.体外重折叠野生型或突变型波形蛋白的方法，包括以下步骤：使重组表达获得的野生型或突变型波形蛋白制备物与pH为8的包含尿素和二硫苏糖醇的缓冲液接触以溶解所述制备物，并获得蛋白溶液，其中所述缓冲液中尿素的浓度为8M，二硫苏糖醇的浓度为10mM；以及在氧化还原混合物存在下，通过透析法阶段式降低蛋白溶液中尿素的浓度，以重折叠野生型或突变型波形蛋白，其中阶段式降低蛋白溶液中尿素的浓度包括通过透析法将所述包含尿素和二硫苏糖醇的缓冲液中尿素的浓度阶段性地降低至初始浓度的50％、25％和0％，其中使用包含尿素并且尿素的浓度梯度降低的三种透析液，所述三种透析液中尿素的浓度分别为所述包含尿素和二硫苏糖醇的缓冲液中尿素的浓度的50％、25％和0％；其中所述突变型波形蛋白为相对于人野生型波形蛋白，在16和59位氨基酸残基突变为精氨酸。
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