[发明专利]一种治疗妇女子宫出血的茜芷中药制剂的检测方法

摘要

本发明公开了一种治疗妇女子宫出血的茜芷中药制剂的质量控制方法,该质量控制方法包括茜芷中药制剂的鉴别方法与含量测定方法；鉴别是对茜芷中药制剂中的茜草对照药材、大叶茜草素、羟基茜草素、三七对照药材、三七皂苷、人参皂苷、白芷对照药材、欧前胡素、异欧前胡素、川牛膝对照药材、杯苋甾酮的薄层色谱鉴别。本发明是一种通过控制茜芷类中药制剂的活性成分进而控制成药质量的分析方法，对茜芷的质量标准进行了提高、完善，在部颁标准基础上，提高了药品的质量控制，保证其质量的稳定性和安全性，提高产品技术水平，利用现代分析手段全面提升茜芷中药制剂的质量标准，使茜芷的生产工艺更加严格合理。

主权项

1.一种治疗妇女子宫出血的茜芷中药制剂的检测方法，其特征在于，该检测方法包括茜芷中药制剂的鉴别方法与含量测定方法；鉴别是对茜芷中药制剂中的茜草、大叶茜草素、羟基茜草素、三七、三七皂苷、人参皂苷、白芷、欧前胡素、异欧前胡素、川牛膝、杯苋甾酮的薄层色谱鉴别；所述鉴别方法为：性状∶所述治疗妇女子宫出血的茜芷中药制剂呈褐色，气芳香，味辛、微苦；鉴别：（1）茜芷中药制剂处方中鉴定茜草的方法是∶取相当于生药材15.25～20.55g的茜芷中药制剂，除去包衣，研细，加入乙醚20～40ml,放置1小时，时时振摇提取，滤过，滤液挥去，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为茜草供试品溶液备用；另取茜草对照药材粉末0.8～1.5g，同茜草供试品溶液制备方法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为8～15∶4～10∶1～3∶4～10的环己烷‑丙酮‑二乙胺‑水为展开剂展开，取出，晾干，置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；取大叶茜草素为对照品，加入甲醇制成1ml含大叶茜草素0.1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液及所述茜草供试品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20～25∶3～ 6∶0.1 ～ 0.8石油醚‑ 乙酸乙酯‑ 冰醋酸为展开剂展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼乙醇试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；该步骤使用的石油醚为60 ～ 90℃；取羟基茜草素为对照品，加入甲醇制成每1ml含羟基茜草素40μg，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液及所述茜草供试品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为15～20∶5～12∶1～2乙酸乙酯‑丙酮‑甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；（2）茜芷中药制剂处方中鉴定三七的方法是∶取相当于生药材13.6～18.6g的茜芷中药制剂，除去包衣，研细，加入5%甲酸的甲醇溶液15～30ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液挥去，残渣加甲醇2ml使溶解，作为三七供试品溶液备用；另取三七对照药材粉末0.8～1.5g，同三七供试品溶液制备方法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为8～12∶6～9∶1～3苯‑乙酸乙酯‑甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；取三七皂苷R1和三七皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液和三七供试品溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为5～12∶3～7∶0.5～1.5氯仿‑甲醇‑冰乙酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱对应的位置上，显相同颜色的斑点；取人参皂苷Rb1对照品和人参皂苷Re对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液和三七供试品溶液各3μl分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为10～18∶35～45∶17～25∶8～12三氯甲烷‑乙酸乙酯‑甲醇‑水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的颜色斑点；（3）茜芷中药制剂处方中鉴定白芷的方法是∶取相当于生药材14.6～19.8g的茜芷中药制剂，除去包衣，研细，加石油醚10～40ml，振摇提取30分钟，滤过，滤渣备用，滤液挥去石油醚至2ml，作为白芷供试品溶液备用；另取白芷对照药材0.4～0.9g，加石油醚（60～90℃）5～10ml，振摇提取30分钟，静置，上清液作为对照药材溶液, 照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为12～20∶2～5∶0.1～0.8石油醚‑乙酸乙酯‑冰醋酸为展开剂，在 25℃以下展开，取出，晾干，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；该步骤使用的石油醚为60 ～ 90℃；取欧前胡素对照品和异欧前胡素对照品，加入乙酸乙酯制成每1ml含有1mg的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液和白芷供试品溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为5～9∶2～5∶0～1石油醚‑乙醚 ‑甲酸为展开剂，在25℃以下展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；该步骤使用的石油醚为30～60℃；（4）茜芷中药制剂处方中鉴定川牛膝的方法是∶取相当于生药材12.7～18.9g的茜芷中药制剂，加乙醇30～50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醚15～25ml，振摇提取，挥干，残渣加乙酸乙酯1ml 使溶解，作为川牛膝供试品溶液；另取川牛膝对照药材1～4g，加乙醇20～40ml，同川牛膝供试品溶液制备方法制成对照药材溶液；照薄层色谱试验，吸取川牛膝供试品溶液6～8μl、对照药材溶液3～5μl，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以体积比为10～25 ∶8～18 ∶1～3甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积比为1∶1％三氯化铁∶1％铁氰化钾的混合溶液加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；取杯苋甾酮对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取川牛膝供试品溶液5～10μl和对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为13～18∶3～5∶1～2氯仿‑丙酮‑甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；所述茜芷中药制剂的含量测定方法，包括采用高效液相色谱法测定茜芷中药制剂中白芷所含欧前胡素的量；色谱条件与系统适用性试验∶流动固定相∶选用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱 ；流动相∶以体积比为 （30∶70）～（65∶35）的组分 A 和组分 B 构成的混合溶剂作为流动相 ；所述组分 A 是体积比为5∶1的乙腈和甲醇溶液，组分 B是0.01 ～ 0.05mol/L 磷酸二氢钾溶液或磷酸二氢钠溶液或磷酸二氢铵溶液，每1000ml流动相加入3ml的三乙胺，用磷酸溶液调节 pH 值至3.0 ～ 4.5 ；检测波长∶ 275 ～ 315nm ；柱温∶25 ～ 45℃ ；流速∶流速 0.8 ～ 1.2ml/min ；供试品溶液的制备∶取相当于生药材 17.56g的茜芷中药制剂，精密称定，研细，取1.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%的甲醇50ml,称定重量，超声提取30 ～ 40分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，滤过，弃去初滤液，剩余的滤液通过孔径为0.45μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液；对照品溶液的制备∶精密称取欧前胡素对照品，精密称定，加甲醇制成每1ml含有20μg 的溶液，摇匀，即得；测定法∶分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。