[发明专利]一种蓝色乳胶微球标记抗体的制备方法及其试纸条

摘要

本发明提供了一种蓝色乳胶微球标记抗体的制备方法及其试纸条，本发明选择诺氟沙星作为目标物，将诺氟沙星抗体加入到蓝色乳胶微球溶液，制得微球标记抗体，建立了检测诺氟沙星的蓝色乳胶微球标记免疫层析分析方法，并应用于动物源性食品中诺氟沙星残留的可视化检测。本发明所述的蓝色乳胶微球标记抗体的制备方法及其试纸条，具有以下优势(1)本发明所述的蓝色乳胶微球标记抗体的制备中，使用的标记材料蓝色乳胶微球，成本远低于氯金酸，降低了现有的农药检测的成本。(2)本发明所述的试纸条，抗体用量少，同样节约了成本。(3)本发明使用的乳胶微球具有分散性好、粒径分布窄、色彩鲜艳等特点。

主权项

一种蓝色乳胶微球标记抗体的制备方法，其特征在于：包括如下步骤，1)用mes缓冲液洗涤50mg﹒mL‑1的蓝色乳胶微球，重复2次，于14000r/min，4℃，离心15min；将沉淀用mes缓冲液稀释至1～5mg﹒mL‑1，4℃保存备用；2)取200μL mg﹒mL‑1的蓝色乳胶微球，依次加入0.5～1mg﹒mL‑1的EDC与NHS，在摇床反应15min；3)用磷酸盐缓冲液洗涤已活化乳胶微球，重复2～5次，于10000～14000r/min，4℃，离心15～20min，将沉淀用磷酸盐缓冲液稀释至1mg﹒mL‑1，0～25℃保存备用；4)在搅拌速度50～150rpm条件下将诺氟沙星抗体加入到上述蓝色乳胶微球溶液中，在0～25℃下，于摇床反应1～2h，得蓝色乳胶微球标记抗体；5)加入1～5μL的20％BSA封闭15min；6)于14000r/min，4℃，离心15min；将最终沉淀用工作液重悬至40μL，4℃保存备用。