[发明专利]一种太阳光条件下培育金花茶种胚组培苗的方法

摘要

本发明涉及一种太阳光条件下金花茶种胚培育组培苗的方法。本发明包括外植体消毒和芽初代培养、芽继代增殖培养、芽生根培养和苗木移栽4个步骤，本发明采用的光源来自太阳光，通过对光照强度的调节，充分发挥太阳光对金花茶组培苗的生长促进作用。太阳光条件下金花茶芽培养40 d，增殖系数9～13，金花茶组培苗生根率高达90%～95%，比使用白炽灯作为光源的方法生根率提高20%以上，同一生根培养基，太阳光条件下芽长根点的时间为20～25 d，白炽灯下芽长根点时间为30～35 d，前者比后者芽长根点时间缩短5～10 d，移栽成活率高达95%以上，达到了产业化生产金花茶苗木的要求。

主权项

1.一种太阳光条件下培育金花茶种胚组培苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）外植体消毒和芽初代培养：6月～7月采集7～8成熟、果壳呈红绿色的金花茶果实，自来水冲洗果实外表尘埃，剥去外果皮，置于超净工作台，用75%酒精溶液消毒30 S，无菌水清洗3～4次，质量分数1‰的HgCl₂溶液浸泡8 min，无菌水清洗3～4次，剥去内果皮，接种于初代培养基中，置于300～800 Lx的太阳光照条件下进行初代培养7～10 d，之后移置于1000～2500 Lx的太阳光照条件下继续培养20～23 d,至胚芽高2～5 cm；（2）芽继代增殖培养：将2～5 cm高胚芽剪切，转接到继代增殖培养基中，置于1500～4000 Lx的太阳光照条件下进行芽继代增殖培养10～15 d，再置于4000～8000 Lx的太阳光照条件下继续培养20~25 d，增殖系数为8～13；（3）芽生根培养：将继代增殖芽中高3～5 cm，叶片翠绿，叶面光亮，带革质，有叶片3～5张的单芽剪切，直插于生根培养基中，置于2000～8000 Lx太阳光照条件下培养15～40 d，当根系长0.5～1 cm时，移至接近自然环境的炼苗棚内炼苗，生根率90~95%；（4）苗木移栽：瓶苗在炼苗棚内炼苗20～30 d，苗木根系由白色变为灰白色时进行移栽，苗木移栽时，先打开瓶盖，取出生根苗，清洗干净粘附于根系上的生根培养基，移栽于经过基质消毒的营养杯内，置于温度15～28℃，湿度70～85%，遮荫度70～80%，阴凉的环境条件下培养，经苗期施肥管护，苗木高≥30 cm，地径≥0.3 cm时出圃或上大杯培养大苗；所述初代培养基的配方为：MS+50 mg/L Na₂SO₄+2 mg/L 6‑苄氨基腺嘌呤+0.5 mg/L 萘乙酸+10 mg/L 维生素C+300 mg/L水解酪蛋白+4.5 g/L琼脂粉+30 g/L蔗糖，pH=5.8；所述继代增殖培养基的配方为：MS+50 mg/L Na₂SO₄+3 mg/L 6‑苄氨基腺嘌呤+1 mg/L萘乙酸+15 mg/L维生素C+ 15～20 mg/L谷氨酰氨+300 mg/L水解酪蛋白+4.5 g/L琼脂粉+30 g/L蔗糖，pH=5.8；所述生根培养基的配方为：2/3 (MS+50 mg/L Na₂SO₄) +3 mg/L 吲哚丁酸+5 mg/L 吲哚乙酸+0.3 mg/L萘乙酸+4.5 g/L琼脂粉+30 g/L蔗糖，或2/3（MS+50 mg/L Na₂SO₄－1650 mg/L NH₄NO₃+100 mg/L Ca(NO₃)₂·4H₂O）+3 mg/L 吲哚丁酸+5 mg/L 吲哚乙酸+0.3 mg/L萘乙酸+4.5 g/L琼脂粉+30 g/L蔗糖，pH=5.8。