[发明专利]一种利用暗紫贝母愈伤组织生产西贝母碱的方法有效
| 申请号： | 201710403578.5 | 申请日： | 2017-06-01 |
| 公开（公告）号： | CN107155887B | 公开（公告）日： | 2019-07-19 |
| 发明（设计）人： | 邓国宾;向建英;张媛;尹进超;曾祥飞;熊毅;唐甜甜 | 申请（专利权）人： | 西南林业大学;云南澈川生物科技有限公司 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00;A61K36/8966 |
| 代理公司： | 昆明科阳知识产权代理事务所 53111 | 代理人： | 徐洪刚;孙山明 |
| 地址： | 650224 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明涉及中药资源开发利用技术领域，具体来说是一种利用暗紫贝母愈伤组织生产暗紫贝母总生物碱的方法，包括以下步骤：（1）疏松愈伤组织的诱导；（2）愈伤组织的增殖及生物碱积累培养；（3）愈伤提取暗紫贝母生物碱。本发明利用暗紫贝母作为贝母总生物碱的提取原料，其愈伤组织具有繁殖快、增殖率高的特点，通过激素调控次生代谢产物积累，达到了快速生产暗紫贝母总生物碱的目的，其培养后的愈伤组织中西贝母碱百分含量高达0.32%，是药典中规定的药材标准含量的6倍多。本发明方法操作简单，贝母总生物碱产量高，适合工业生产应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 贝母 组织 生产 生物碱 方法 | ||
【主权项】：
1.一种利用暗紫贝母愈伤组织生产西贝母碱的方法，其特征在于，步骤包括：(1)愈伤组织的诱导：以实验室通过组织培养生产的鳞茎为外植体，选取幼嫩的鳞瓣片切成0.5cm的小块，接种于MS+NAA 1‑2mg/L+6‑BA0.5‑1mg/L+2,4‑D1‑1.5mg/L+琼脂5g/L+蔗糖30g/L的培养基上，控制pH为5.8、培养室温度为23±1℃、空气相对湿度50％‑60％、光照时间12小时/天、光照强度2000L条件下诱导培养30‑35天获得到大量愈伤组织；(2)增殖与生物碱积累培养：将步骤(1)中产生的愈伤组织切成0.8×0.8cm，接种至MS+ZT1.5‑3mg/L+NAA0‑0.2mg/L+琼脂4.5g/L+蔗糖30g/L的培养基中，控制培养温度23±1℃、空气相对湿度50％‑60％、光照时间12小时/天、光照强度2000L条件下培养30‑35d后获得生物碱含量高的培养物；(3)贝母生物碱含量测定：收集步骤(2)培养后的愈伤组织，置于干燥的滤纸上吸收水分，并放入烘箱中40℃烘干至恒重，以西贝母碱为对照，提取暗紫贝母西贝母碱，并检测其含量。
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