[发明专利]一种植物乳杆菌高产胞外多糖的方法

摘要

本发明公开了一种植物乳杆菌高产胞外多糖的方法。本发明所使用的菌株在本发明中的发酵条件下所产生的EPS具有高效降胆固醇的功能，体现在：1)通过单因素优化实验获得菌株最佳产胞外多糖的发酵条件，其产量可高达2.67～3.18g/L；2)通过优化前与优化后的EPS降胆固醇能力比较，EPS降胆固醇能力得到了明显提升；3)通过单因素体外定性实验，其EPS具有高效的胆固醇清除能力，最高可达59％；4)通过实验发现分泌到胞外的未经过提取纯化的EPS依然具有一定的胆固醇清除能力。使用本发明中的发酵条件和制备方法可提高微生物EPS产量，并且获得的EPS有高效降胆固醇能力，具有广阔的降脂药物和保健品的开发应用。

主权项

一种植物乳杆菌高产胞外多糖的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)植物乳杆菌La‑10在改良MRS液体培养基中静置发酵，其接种量为3％～5％，得菌体发酵液；所述的静置发酵的条件为25℃～31℃静置发酵30h～40h；所述的改良MRS液体培养基：大豆蛋白胨10.0g/L、牛肉膏10.0g/L、酵母膏5.0g/L、蔗糖30～40g/L、K2HPO4为2.0g/L、乙酸钠5.0g/L、柠檬酸三铵2.0g/L、MgSO4·7H2O为0.58g/L、MnSO4·4H2O为0.25g/L、吐温‑80为1.0mL/L，pH6.2～6.4，灭菌，备用；(2)将步骤(1)得到的菌体发酵液离心，取上清液；加入三氯乙酸除蛋白，4℃条件下静置，离心取上清液；95％乙醇沉淀多糖，离心弃上清液，沉淀透析后得到粗多糖，测定提取量并冻干成粉末状，即植物乳杆菌胞外多糖。