[发明专利]一种顶空气相色谱快速检测抗菌纸抑菌性的方法

摘要

本发明公开了一种顶空气相色谱快速检测抗菌纸抑菌性的方法。采用顶空气相色谱技术建立了一种快速评价抗菌纸抑菌性的方法，主要是通过检测在规定的培养过程中消耗的氧气量或生成的二氧化碳量来反映细菌的生长程度，从而实现对抗菌纸的抑菌性进行评价。结果表明在37℃、培养时间6h‑8h、大肠杆菌菌液浓度为2.9×102CFU/mL、培养液体积为5mL、培养容器为顶空瓶的条件下，最适宜氧气和二氧化碳信号的检测，并可简便准确计算出抑菌率值。本方法与传统方法(48h‑72h)相比，大大提高了检测的效率，适合用于对抗菌纸抑菌性的快速评价。

主权项

一种顶空气相色谱快速检测抗菌纸抑菌性的方法，其特征在于，通过测定氧气和二氧化碳信号值间接反映出细菌的生长情况，继而计算出抗菌纸的抑菌率；包括如下步骤：步骤(1)：样品制备：制备抗菌纸：将壳聚糖用乙酸溶液溶解，调pH为弱碱性，抽滤制得壳聚糖凝胶；将壳聚糖凝胶涂布于滤纸表面制得抗菌纸；制备LB液体和固体培养基：胰蛋白胨、酵母提取物、氯化钠，加入蒸馏水搅拌溶解，用氢氧化钠溶液调节pH值为中性，高压灭菌后制得液体培养基；取上述液体培养基加入琼脂并加热使其形成溶液，高压灭菌后制得固体培养基；制备不同浓度的大肠杆菌菌液：先取市购大肠杆菌菌液并进行培养，之后将菌液稀释，得到不同浓度的菌液，并对低浓的菌液进行计数；步骤(2)：菌液的培养：将不同浓度的菌液和抗菌纸装入顶空瓶并置于恒温培养箱中进行培养，并设置对照组；步骤(3)：样品检测：用顶空气相色谱检测顶空瓶内氧气与二氧化碳信号值；步骤(4)：结果分析：做出步骤(3)菌液产生的氧气与二氧化碳信号值图像，利用实验组与对照组的氧气与二氧化碳差值计算出抗菌纸的抑菌率。