[发明专利]一种基于适配体修饰磁珠和金纳米颗粒模拟酶活性检测卡那霉素的比色分析方法

摘要

一种基于适配体修饰磁珠和金纳米颗粒模拟酶活性检测卡那霉素的比色分析方法，属于分析化学技术领域。本发明利用酪氨酸还原氯金酸合成的金纳米颗粒模拟酶AuNPs所固有的类过氧化物酶活性，借助卡那霉素特异性适配体修饰磁珠对其互补单链cDNA修饰的金纳米颗粒的捕获，及卡那霉素与适配体结合对金纳米颗粒的置换作用，通过磁性分离后上清液中含有的与卡那霉素浓度呈相关的金纳米颗粒AuNPs的类过氧化物酶活性催化底物四甲基联苯胺（TMB）和H2O2的显色反应，实现对卡那霉素可视化检测，并利用450 nm处的吸收值与卡那霉素浓度间的线性关系实现对卡那霉素的比色法定量分析。该方法具有灵敏度高、专一性好等优点，并适合用于对蜂蜜等食品样品中卡那霉素残留的定量分析。

主权项

一种基于适配体修饰磁珠和金纳米颗粒模拟酶活性检测卡那霉素的比色分析方法，其特征是步骤为：利用酪氨酸作为还原剂制备具有类过氧化物酶的金纳米颗粒模拟酶AuNPs；采用与卡那霉素特异性适配体互补的cDNA修饰金纳米颗粒获得功能化金纳米颗粒AuNPs‑cDNA；利用链霉亲和素修饰的磁珠和生物素修饰的卡那霉素适配体制备适配体修饰的磁珠MBs‑aptamer；通过适配体和cDNA的互补杂交制备出MBs‑aptamer‑cDNA‑AuNPs复合物；在优化的反应条件下，将含不同浓度的卡那霉素的样品与复合物混合，卡那霉素竞争结合适配体并释放出AuNPs‑cDNA；磁性分离去除磁珠和仍结合在磁珠上的AuNPs后，往上清液中加入显色底物，通过分光光度测定绘制得到吸光度与卡那霉素浓度的线性关系；以同样的试剂和步骤对蜂蜜样品中的卡那霉素进行检测。