[发明专利]从菌丝体中分离纯化他克莫司的方法及应用

摘要

本发明公开了一种从菌丝体中分离纯化他克莫司的方法及应用。本发明通过用亲水型离子液体溶解筑波链霉菌菌丝体，再用有机溶剂萃取除去脂肪和脂肪酸等成分。然后采用疏水型离子液体－亲水型离子液体两相萃取的方法，将他克莫司等成分转移到疏水离子液体相中。最后通过超临界CO₂萃取的方法进行分离纯化，得到他克莫司晶体。本发明提供的方法能有效回收他克莫司，回收率达70～85％，得到的他克莫司纯度在90％以上。该方法适合用于工业上分离纯化他克莫司。

主权项

1.一种从菌丝体中分离纯化他克莫司的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）将筑波链霉菌菌丝体与亲水型离子液体混合；常压下惰性气体氛围中或者真空环境下加热搅拌，加热条件为于40～90℃反应0.5～5小时；（2）步骤（1）反应后的菌丝体－亲水型离子液体溶液与有机溶剂A混合，进行萃取；（3）使用疏水型离子液体与步骤（2）萃取后的菌丝体－亲水型离子液体溶液混合，常压惰性气体氛围中或者真空环境下加热搅拌，加热条件为于40～90℃反应0.5～5小时，然后静置分层，取疏水相，回收含亲水型离子液体的亲水相；（4）使用超纯水对步骤（3）的疏水相进行水洗；（5）对步骤（4）水洗后的疏水相中的他克莫司 成分进行超临界CO₂萃取，收集萃取物，回收含疏水型离子液体的溶剂；萃取物干燥后用有机溶剂B溶解，得到萃取物溶液；（6）将液态二氧化碳和步骤（5）的萃取物溶液同时注入超临界CO₂反应器的顶部，通过雾化的方法喷入反应腔反应；二者在反应腔内充分混合后流过底部的筛板沉淀器，收集聚集在沉淀器的他克莫司结晶，得到他克莫司；步骤（1）中所述的亲水型离子液体的阳离子为1‑丙基‑3‑甲基咪唑、1‑烯丙基‑3‑甲基咪唑、1‑丁基‑3‑甲基咪唑和1‑戊基‑3‑甲基咪唑中的一种或至少两种；步骤（1）中所述的亲水型离子液体的阴离子为氯、醋酸中的一种或两种；步骤（3）中所述的疏水型离子液体的阳离子为1‑癸基‑3‑甲基咪唑、1‑十二烷基‑3‑甲基咪唑和1‑己基‑2,3‑二甲基咪唑中的一种或至少两种；步骤（3）中所述的疏水型离子液体中的阴离子为溴和六氟磷酸中的一种或两种；步骤（2）中所述的有机溶剂A为己烷和石油醚中的一种或两种；步骤（5）中所述的有机溶剂B为二甲基亚砜或乙腈。