[发明专利]一种利用组织培养快速繁殖藏药柳茶的方法

摘要

本发明公开了一种利用组织培养快速繁殖藏药柳茶的方法，所述方法采用以下组分的组织培养MS培养基：硝酸钾1700‑2100mg/L、硝酸铵1450‑1850mg/L、硫酸镁150‑190mg/L、二水氯化钙350‑390mg/L、碘化钾420‑460mg/L、硼酸0.81‑0.85mg/L、硫酸锰6.0‑6.4mg/L、硫酸锌20‑24mg/L、钼酸钠8.4‑8.8mg/L、硫酸铜0.23‑0.27mg/L、氯化钴0.023‑0.027mg/L、乙二胺四乙酸二钠35‑39mg/L、硫酸亚铁25‑30mg/L、肌醇95‑105mg/L、甘氨酸1.8‑2.2mg/L、盐酸硫胺素0.08‑0.12mg/L、盐酸吡哆醇0.48‑0.52mg/L、烟酸0.48‑0.52mg/L、蔗糖28000‑32000mg/L、琼脂6800‑7200mg/L。本发明通过组培技术对柳茶进行培育，为人工栽培提供种苗来源，解决了野生柳茶因人们过度采集而导致的匮乏。

主权项

1.一种利用组织培养快速繁殖藏药柳茶的方法，其特征在于：包括以下步骤，1）外植体的选择与处理；2）柳茶愈伤组织的诱导；3）柳茶丛生芽的诱导与培养；4)柳茶的生根培养；5) 柳茶组培苗的移栽驯化；步骤2）所述柳茶愈伤组织的诱导方法如下：将制备好的柳茶嫩叶外植体切成大小为0.5cm的小块，转入已灭菌的MS+1.0 mg/L 2,4‑D+0.5 mg/L 6‑BA+0.5 mg/L NAA，pH值为 5.8的培养基上，置于温度20‑25℃，光照时间12小时，光照强度为1500‑2500lx的人工气候培养箱中进行培养，直至诱导形成愈伤组织；步骤3）柳茶丛生芽的诱导与培养方法如下：将步骤2）培养获得的呈绿色的嫩叶愈伤组织接种在配比为MS+ 1.0 mg/L 6‑BA + 0.5mg/L NAA的丛生芽诱导培养基上进行培养，培养条件为：20～25℃条件下全暗培养7～14天，然后置于培养温度为20～25℃，每天光照10～12小时，光照强度为2000～3000lx的条件下培养直至形成丛生芽；步骤4）所述柳茶的生根培养方法如下：将步骤3)培养获得的丛生芽分切成单芽后接种到配比为1/2MS + 0.5mg/L NAA的生根培养基上进行生根培养，培养至生根；培养条件为：温度20～25℃，每天光照10～12小时，光照强度为3000～4000lx；其中，采用以下组分的MS培养基：硝酸钾1700‑2100 mg/L、硝酸铵1450‑1850 mg/L、硫酸镁150‑190 mg/L、二水氯化钙350‑390 mg/L、碘化钾420‑460 mg/L、硼酸0.81‑0.85 mg/L、硫酸锰6.0‑6.4mg/L、硫酸锌20‑24 mg/L、钼酸钠8.4‑8.8 mg/L、硫酸铜0.23‑0.27 mg/L、氯化钴0.023‑0.027 mg/L、乙二胺四乙酸二钠35‑39mg/L、硫酸亚铁25‑30 mg/L、肌醇95‑105 mg/L、甘氨酸1.8‑2.2 mg/L、盐酸硫胺素0.08‑0.12 mg/L、盐酸吡哆醇0.48‑0.52mg/L、烟酸0.48‑0.52 mg/L、蔗糖28000‑32000 mg/L、琼脂6800‑7200 mg/L。