[发明专利]一种龙脑樟试管苗增殖及复壮方法

摘要

本发明涉及一种龙脑樟试管苗增殖及复壮方法，包括试管苗的增殖培养和复壮培养。龙脑樟试管苗增殖培养以改良MS为基本培养基，并附加分裂素6‑BA0.8～1.2mg/L、生长素NAA0.045～0.055mg/L、赤霉素GA₃0.1～0.3mg/L、防褐剂AgNO₃1.0～2.0mg/L，先黑暗培养1～3天后转光照培养，培养周期为25～35天；连续增殖培养三代后进行复壮培养，以改良1/2MS为基本培养基，附加生长素NAA0.045～0.055mg/L、活性炭1.0～1.5g/L、椰汁50～100ml/L，光照培养15～20天，每增殖培养三代后进行一代复壮培养。本发明克服了龙脑樟试管苗长期离体培养下出现的增殖系数不高、玻璃化和褐化、叶片发黄萎蔫等问题，提供了一种增殖系数高，有效降低玻璃化和褐化，保证龙脑樟试管苗生长质量的增殖壮苗培养方法。

主权项

1.一种龙脑樟试管苗增殖及复壮方法，其特征在于包括下述的步骤：1)将龙脑樟不定芽接种于增殖培养基中，进行增殖培养；所述增殖培养基以改良MS培养基为基本培养基，并附加分裂素6‑BA 0.8～1.2mg/L、生长素NAA 0.045～0.055mg/L、赤霉素GA3 0.1～0.3mg/L、防褐剂AgNO3 1.0～2.0mg/L、蔗糖25～35g/L以及卡拉胶5.0～6.0g/L；所述改良MS培养基：氯化钙含量为MS培养基的2倍，硝酸铵含量为MS培养基的1/4，其他成分含量与MS培养基相同；所述增殖培养条件为：先置于黑暗环境下培养1～3天，之后转光照培养，增殖培养周期为25～35天；2)将不定芽接种于复壮培养基中，每连续增殖培养三代后进行一次复壮培养；所述复壮培养基以改良1/2MS培养基为基本培养基，并附加生长素NAA 0.045～0.055mg/L、活性炭1.0～1.5g/L、椰汁50～100ml/L、蔗糖25～35g/L以及卡拉胶5.0～6.0g/L；所述改良1/2MS培养基：大量元素含量为改良MS培养基的1/2，其他成分与改良MS培养基相同；所述复壮培养条件为：光照培养，培养周期为15～20天。