[发明专利]一种甘薯茎尖分生组织培养及试管苗低温保存的方法

摘要

本发明是一种甘薯茎尖分生组织培养及试管苗低温保存的方法，具体步骤为剪取甘薯苗顶芽，消毒处理；在体视显微镜下，剥出甘薯顶芽，放在培养基上培养，然后将发绿后的芽转移到不加激素的MS培养基上培养成苗；(3)茎尖苗成株后，经过切段繁殖，作为种质保存材料；将种质保存材料上的茎尖苗切成单一节段，接种在加入生长延缓剂并且经过灭菌处理好的基本培养基MS上培养；然后当幼苗长成3‑4片叶，2‑3cm高时，转移到温度为17‑18℃，光照强度为1500lx，光照时长为8h/d的条件下作为种质长期保存。本发明通过在培养基上加入生长延缓剂，可以将甘薯试管苗保存时间延长，存活率提高，为建立甘薯试管苗贮存提供了技术依据。

主权项

一种甘薯茎尖分生组织培养及试管苗低温保存的方法，其特征在于，具体步骤为：(1)甘薯茎尖分生组织处理剪取甘薯苗顶芽，去掉叶片，用0.1％洗衣粉水浸泡15‑20min，接着置于自来水龙头下冲洗50min，随后在超净工作台上用70％乙醇浸泡20s，用5％安替福尼溶液消毒8‑9min，最后用无菌水冲洗5‑10次；(2)接种培养成苗在体视显微镜下，剥出甘薯分生组织细胞圆锥体并附带1‑2个叶原基，切取芽的长度为0.3‑0.35mm，放在MS+KT 2mg/L+IAA 0.5mg/L+0.5％琼脂固化的培养基上培养10‑12天，然后将发绿后的芽转移到不加激素的MS培养基上培养成苗；(3)获取种质保存材料接种培养后的苗培养2‑3个月，茎尖苗成株后，经过切段繁殖，作为种质保存材料；(4)试管苗低温保存将种质保存材料上的茎尖苗切成单一节段，接种在加入生长延缓剂并且经过灭菌处理好的基本培养基MS上培养，基本培养基的pH为5.7‑5.8，培养温度为28℃，光照强度为3000‑4000lx，光照时长为14‑15h/d；然后当幼苗长成3‑4片叶，2‑3cm高时，转移到温度为17‑18℃，光照强度为1500lx，光照时长为8h/d的条件下作为种质长期保存。