[发明专利]基于分子印迹聚合物包金核壳纳米粒子的黄曲霉素B1分子SERS检测方法

摘要

基于分子印迹聚合物包金核壳纳米粒子的黄曲霉素B1分子SERS检测方法，涉及表面增强拉曼检测。合成金纳米粒子，在金纳米粒子周围包覆黄曲霉素B1分子印迹聚合物，制备得以金纳米为核，分子印迹聚合物为壳的核壳纳米粒子。将壳层的分子印迹聚合物中的模板分子洗脱后，分子印迹聚合物内的空穴可特异性地捕获黄曲霉素B1分子，由于处于金纳米粒子等离子体共振磁场的有效范围内，可实现黄曲霉素B1分子的表面增强拉曼分析检测。以黄曲霉素B1分子为模板分子制备的分子印迹壳层，经过洗脱后得分子印迹聚合物，对黄曲霉素B1具有高度特异性吸附，用作SERS基底可实现黄曲霉素B1的定量检测。该方法的特点是特异性高且样品分析时间短。

主权项

1.基于分子印迹聚合物包金核壳纳米粒子的黄曲霉素B1分子SERS检测方法，其特征在于包括以下步骤：1）合成金纳米粒子：所述合成金纳米粒子的具体方法如下：取氯金酸水溶液于容器中，回流加热至沸腾，再加入柠檬酸钠水溶液，保持沸腾状态继续搅拌，加入柠檬酸钠后，溶液颜色首先由淡黄色迅速变成深蓝色，然后逐渐变成酒红色并保持稳定40min后，即制得金纳米粒子，所述金纳米粒子为球形或椭圆形金纳米粒子，粒径为40~80nm；所述氯金酸水溶液与柠檬酸钠水溶液的体积比为（100~200）︰（1~2）；2）配制预聚合溶液：所述配制预聚合溶液的具体方法如下：配制甲基丙烯酸溶液，加入黄曲霉素B1溶液，混匀后冷藏静置，即得预聚合溶液；所述甲基丙烯酸溶液的摩尔浓度为（1.1~1.3）×10‑3mol/L；所述黄曲霉素B1溶液与甲基丙烯酸的浓度比为1︰（4~5）；所述冷藏的温度为3~5℃，静置的时间为4~6h；3）合成核壳纳米粒子：所述合成核壳纳米粒子的具体方法如下：将金溶胶浓缩，重新分散在装有乙腈的容器中，加入步骤2）得到的预聚合溶液，再加入交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯溶液和聚乙烯吡咯烷酮溶液，然后加入自由基反应的引发剂偶氮二异丁腈，搅拌混匀，通氮气排除体系内空气后密封，恒温油浴反应，即得以金纳米粒子为核，黄曲霉素B1分子印迹聚合物为壳层的核壳纳米粒子；所述将金溶胶浓缩是将40mL金溶胶浓缩至1mL；所述乙腈的加入量为40~60mL；所述乙二醇二甲基丙烯酸酯溶液的摩尔浓度为（1.1~1.3）×10‑3mol/L，所述聚乙烯吡咯烷酮溶液的质量分数为1%~1.5%；所述偶氮二异丁腈的加入量为20~50mg；所述恒温油浴反应的温度为60~65℃，恒温油浴反应的时间为6~8h；4）壳层内模板分子的洗脱：所述壳层内模板分子的洗脱的具体方法为：将步骤3）制得的核壳纳米粒子用甲醇和乙酸混合液在转速6000~7000r/min下离心5~7min，再清洗至不含黄曲霉素B1；所述甲醇和乙酸混合液中的甲醇与乙酸的体积比为9︰1；所述再清洗至不含黄曲霉素B1，是将核壳纳米粒子在拉曼检测时不出现黄曲霉素B1在1129cm‑1、1179cm‑1、1308cm‑1和1591cm‑1的特征峰；5）黄曲霉素B1的SERS定量分析检测：所述黄曲霉素B1的SERS定量分析检测的具体方法为：将步骤4)得到的纳米粒子与黄曲霉素B1溶液进行混合，静置吸附后，取混合液滴在硅片上，待其自然干燥后在拉曼光谱仪上进行SERS定量分析检测，表面增强拉曼光谱检测的激发光源波长为500～800nm，激光光斑为1～2μm；所述静置吸附的时间为1～2h；所述SERS定量分析检测是以固体黄曲霉素B1的1129cm‑1、1179cm‑1、1308cm‑1和1591cm‑1的四处特征峰为判断依据，以黄曲霉素B1浓度的负常用对数值为横坐标，以上述特征峰的强度为纵坐标，制作标准回归曲线，线性相关系数R2达到0.99以上，以标准回归曲线为工作曲线检测不同浓度黄曲霉素B1，SERS定量分析的线性范围为10‑11～10‑4mol/L。