[发明专利]一种从鲎试剂生产废料中提取抑菌组合物的方法

摘要

本发明涉及一种从鲎试剂生产废料中提取抑菌组合物的方法，方法包括：(1)原料处理，将鲎试剂生产过程中乳化物离心后的下层沉淀丢弃物作为原料备用，将鲎试剂生产过程中丢弃的血浆作为原料备用；(2)鲎素肽粗提液的制备，包括：酸解、调pH去沉淀及热变性处理；(3)血浆中血蓝蛋白粗提液的制备；(4)血浆中SOD粗提液的制备；(5)将上述三种粗提液按60‑80份的鲎素肽粗提液，10‑20份的血蓝蛋白粗提液，10‑20份的SOD粗提液混合，调节pH值4‑5后过滤，得到最终形式的抑菌组合物。本发明中各种粗提液采用快速，便捷的低成本提取方式，最终得到的抑菌组合物能有效的抑制各类细菌及真菌的生长，较传统化学抑菌产品而言，更为安全温和有效，无毒副作用，能避免常规抑菌产品耐药性和过敏现象的发生。

主权项

一种从鲎试剂生产废料中提取抑菌组合物的方法，其特征在于该方法包括步骤如下：(1)原料处理a.收集鲎全血，b.分离鲎血细胞及血浆，其中，鲎血细胞先用于鲎试剂生产，在鲎试剂生产过程的鲎血细胞裂解分纯的工艺中，将乳化物离心后的下层沉淀丢弃物作为原料备用，将鲎试剂生产过程中丢弃的血浆作为原料备用；(2)鲎素肽粗提液的制备a.酸解：将鲎细胞乳化物离心后的下层沉淀以固液比例1:6.5‑8.0的比例加入20m mol/L的酸液，低温超声破碎，破碎条件为：每100ml超声波输出功率为700W，超声波总作用时间为10min,每次超声作用时间为10S，反复超声3次，收集上清液即为细胞酸抽提液；b.调pH去沉淀：将酸抽提液用NaOH调节pH至6.5，离心除沉淀，得上清液；c.热变性处理：上清液沸水浴处理5‑10min,4℃下离心弃沉淀收集上清液，上清液用0.22uM膜过滤得鲎素肽粗提液；(3)血浆中血蓝蛋白粗提液的制备将上述步骤(1)中的血浆经300000g超离心3.5h，即得到初步提纯的血蓝蛋白沉淀，将沉淀再溶于pH7.0，0.2mol/L磷酸缓冲液中，即为血蓝蛋白粗提液；(4)血浆中SOD粗提液的制备按质量份数计，取100份上述步骤(1)中的鲎血浆，加入34份0.05mol/L磷酸盐缓冲液和100份0.9％NaCl溶液，轻轻搅拌混匀，将混合液置于65℃水浴锅中，恒温20min后，急冷至10℃，离心去除沉淀，取上清液，即为SOD粗提液；(5)粗提液的混合将上述三种粗提液按60‑80份的鲎素肽粗提液，10‑20份的血蓝蛋白粗提液，10‑20份的SOD粗提液混合，使用pH调节剂调节pH值4‑5后过滤，得到最终形式的抑菌组合物。