[发明专利]一种从蛹虫草子实体上快速分离培养单孢的方法

摘要

本发明涉及一种从蛹虫草子实体上快速分离培养单孢的方法。该方法包括取距蛹虫草子实体顶部1/2～1/3区域内部位，分割后取一段粘贴在干燥密封盖上，倒悬在灭菌水上方，闭盖培养，获得孢子悬浮液；吸取孢子悬浮液转移至平板培养基上，涂抹均匀后黑暗倒置培养12小时以上；寻找挑取单个萌发的孢子，转移至灭菌培养管中，于18～22℃条件下闭盖培养；获得单孢培养物。该方法实用性强，便于操作。本发明可简单快捷的对蛹虫草子实体的孢子进行分离及培养，简化实验操作，提高培养成功率。分离培养物可进行单细胞杂交试验、遗传多样性分析、种质资源鉴定、遗传图谱的构建和功能基因的研究；相较传统方法，可以大大缩短分析周期，提高效率。

主权项

一种从蛹虫草子实体上快速分离培养单孢的方法，包括步骤如下：(1)向带有密封盖的培养管加水、灭菌，得灭菌水，干燥密封盖，备用；(2)取距蛹虫草子实体顶部1/2～1/3区域内部位，分割成数段，每段虫草子实体的长度小于密封盖的内径；(3)取其中一段虫草子实体，粘贴在干燥密封盖上，倒悬在灭菌水上方，闭盖，于20～25℃条件下培养24～48h，待虫草子实体上的孢子弹落灭菌水中形成孢子悬浮液；(4)将PDA培养基倒入培养皿中，制得平板培养基，吸取孢子悬浮液转移至平板培养基上，涂抹均匀，置于温度20～25℃下黑暗倒置培养12小时以上；(5)另外取PDA培养基装入干净的培养管中，灭菌后备用；(6)将步骤(4)的培养皿置于体式镜下，观察寻找单个萌发的孢子，挑取萌发的孢子，转移至步骤(5)中的培养管中，于18～22℃条件下闭盖培养；获得单孢培养物。