[发明专利]一种重组人血管内皮抑制素生物活性检测方法有效

专利信息
申请号: 201710019912.7 申请日: 2017-01-12
公开(公告)号: CN108303384B 公开(公告)日: 2020-04-03
发明(设计)人: 姜桂香;刘珊珊;刘晓艳;陈倩洁;陈虹 申请(专利权)人: 山东先声生物制药有限公司;江苏先声药业有限公司
主分类号: G01N21/31 分类号: G01N21/31;G01N33/535
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 264006 山东*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明涉及一种重组人血管内皮抑制素生物活性检测方法,该方法为分别利用样品和标准品活性测定结果中呈直线的效价区间中的浓度梯度点抑制HUVEC细胞增殖,并采用MTS比色法测定血管内皮抑制素对HUVEC的增殖抑制活性,进而使用量反应平行线测定方法分析重组人血管内皮抑制素对血管生成抑制的生物活性。该活性检测方法可适用于低浓度的样品检测,显著提高方法重复性,缩小方法误差范围。
搜索关键词: 一种 重组 血管 内皮 抑制 生物 活性 检测 方法
【主权项】:
1.一种重组人血管内皮抑制素生物活性的检测方法,包括如下步骤:(1)人脐静脉血管内皮细胞传代培养至对数生长期,胰酶消化后均匀悬浮,接种相同体积的细胞悬液至培养孔中;(2)预估待测样品的活性,将重组人血管内皮抑制素标准品和待测样品稀释至多个效价一致的浓度梯度点,向步骤(1)中的培养孔中加入相同体积的各浓度梯度点的重组人血管内皮抑制素标准品或待测样品继续培养;(3)采用MTS染色法,测定培养孔中的OD值;(4)按照量反应平行线法计算实验结果。
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