[发明专利]一种快速测定磺胺类抗生素残留的仿生酶联免疫检测方法

摘要

本发明公开了一种快速测定磺胺类抗生素残留的仿生酶联免疫检测方法，特点是包括以下步骤：（1）将环己烷和Triton X‑100加入两口烧瓶中，磁力搅拌后依次加入量子点、正硅酸乙酯和氨水，磁力搅拌后加入模板分子溶液以及功能单体，室温下聚合反应后除去磺胺类抗生素，再分散于乙醇磷酸盐溶液中，得到分子印迹‑量子点纳米结构人工抗体溶液；（2）在每个酶标孔中依次加入分子印迹‑量子点纳米结构人工抗体溶液和样品提取液；将酶标板室温育10 min，然后用酶标仪读出发射波长在605nm下的数值，根据荧光值由标准曲线计算出样品提取液中磺胺类抗生素含量，优点是特异性强、灵敏度高、合成简单、稳定性好和检测时间短。

主权项

1.一种快速测定磺胺类抗生素残留的仿生酶联免疫检测方法，其特征在于包括以下步骤：(1)分子印迹‑量子点纳米结构人工抗体的制备将7.5mL环己烷和1.8mL Triton X‑100加入两口烧瓶中，于150rpm磁力搅拌15min，然后依次加入400μL浓度为2.5nmol/mL的量子点溶液、50μL正硅酸乙酯和100μL氨水，磁力搅拌2h；然后加入200μL浓度为1.0‑5.0mg/mL的模板分子溶液以及20‑25μL的功能单体，室温下聚合反应12h后；再加入10mL丙酮，涡旋1min，然后于9000rpm离心10min，弃掉上清液后，再加入6mL双蒸水，充分分散后，于9000rpm离心10min，最后用10.0mL由体积比为8：2的乙醇和乙腈组成的混合液洗脱2h以除去磺胺类抗生素，再分散于1.0mL乙醇磷酸盐溶液中，得到分子印迹‑量子点纳米结构人工抗体溶液，其中乙醇磷酸盐溶液中乙醇质量分数为50‑80％；所述的量子点是CdS/ZnS，所述的分子印迹‑量子点纳米结构人工抗体的粒径为150nm；所述的模板分子为磺胺嘧啶、磺胺甲嘧啶、磺胺‑5‑甲氧嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑或者磺胺二甲氧嘧啶；所述的功能单体为氨丙基三乙氧基硅烷或者甲基丙烯酸；(2)待测样品检测A.用乙醇将酶标孔润洗3次，然后在每个酶标孔中依次加入50μL分子印迹‑量子点纳米结构人工抗体溶液和150μL样品提取液；并设置空白对照酶标孔组，空白对照酶标孔组每孔加入150μLpH为8‑10的磷酸盐缓冲液；B.将酶标板室温育10min，然后用酶标仪读出发射波长在605nm下的数值，根据荧光值由标准曲线计算出样品提取液中磺胺类抗生素含量。