[发明专利]一种双和汤标准汤的HPLC指纹图谱测定方法

摘要

本发明提供了一种双和汤标准汤的HPLC指纹图谱测定方法，属于中药技术领域，(1)供试样品溶液的制备；(2)混合对照品溶液的制备；(3)单味药材阴性对照品溶液的制备；(4)分别精密吸取供试样品溶液、混合对照品溶液和单味药材阴性对照品溶液注入高效液相色谱仪进行测定，分别得到供试样品溶液、混合对照品溶液和单味药材阴性对照品溶液的液相色谱；(5)采用国家药典委员会制定的中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件，对供试样品溶液、混合对照品溶液和单味药材阴性对照品溶液的液相色谱进行数据匹配，即得标准指纹图谱。本发明有效的控制了双和汤标准颗粒剂的质量，保证了药物的疗效，使经典名方得到了更为正规的质量控制。

主权项

一种双和汤标准汤的HPLC指纹图谱测定方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)供试样品溶液的制备：精密量取不同批次的双和汤的标准汤，加载于已活化好的SPE柱，先用30体积份数的纯水洗脱，弃去洗脱液，再用10重量份数的甲醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液低温浓缩至干，最后用2体积份数的甲醇溶解，用微孔滤膜过滤，取续滤液，得供试样品溶液，备用；(2)混合对照品溶液的制备：精密称取5‑HMF、芍药苷、毛蕊异黄酮苷、甘草苷、阿魏酸、桂皮醛、甘草酸、6‑姜酚对照品适量，加甲醇配制成每1体积份数含5‑HMF、芍药苷、毛蕊异黄酮苷、甘草苷、阿魏酸、桂皮醛、甘草酸、6‑姜酚分别为0.01、0.12、0.03、0.01、0.01、0.04、0.05和0.03重量份数的混合对照品溶液，摇匀，滤过，备用；(3)单味药材阴性对照品溶液的制备：按照3倍处方量称取各单味药材粉末，粉碎，过筛得粗粉，取3倍处方量粗粉至全自动煎药锅中，精密量取纯水，浸泡，煎煮，煎煮期间搅拌，趁热过滤，滤液混合均匀，取适量用纯水定容至250mL容量瓶中即为单味药材阴性对照品溶液，备用；(4)分别精密吸取供试样品溶液、混合对照品溶液和单味药材阴性对照品溶液注入高效液相色谱仪进行测定，分别得到供试样品溶液、混合对照品溶液和单味药材阴性对照品溶液的液相色谱；(5)采用国家药典委员会制定的中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件，对供试样品溶液、混合对照品溶液和单味药材阴性对照品溶液的液相色谱进行数据匹配，即得标准指纹图谱；所述重量份数与所述体积份数的关系为g/mL；所述步骤(4)的色谱条件如下：色谱柱：Accurasil C18色谱柱，4.6mm×250mm，5μm；流动相：乙腈‑0.1％磷酸水溶液；流速：1.0mL/min；波长：280nm；进样量：10μL；柱温：30℃；理论塔板数按芍药苷峰计算不低于7000；梯度洗脱程序见表1。表1 指纹图谱梯度洗脱程序