[发明专利]基于α-羟基酸的蛋白纯化方法有效

专利信息
申请号: 201611240228.3 申请日: 2016-12-29
公开(公告)号: CN107354189B 公开(公告)日: 2018-11-02
发明(设计)人: 安泰;王磊;陈博;杨鑫;朱威宇;朱镜羲;林海龙;牛兴和;郝小明 申请(专利权)人: 中粮营养健康研究院有限公司;中粮集团有限公司
主分类号: C12P21/00 分类号: C12P21/00;C07K19/00;C07K1/14;C12N1/21;C12N1/15;C12N1/19;C12N5/10
代理公司: 北京信慧永光知识产权代理有限责任公司 11290 代理人: 洪俊梅;张淑珍
地址: 102209 北京市*** 国省代码: 北京;11
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 发明涉及一种基于α‑羟基酸对目的蛋白进行纯化的方法。具体而言,本发明的蛋白纯化方法通过将α‑羟基酸和功能片段与目的蛋白相连,利用功能片段进行纯化,随后通过改变pH条件使得α‑羟基酸水解,从而获得目的蛋白。该纯化方法适用于对多种表达系统表达的蛋白进行纯化,具有成本低、流程简单、易于工业化实现等优点,可用于实验室规模的高通量蛋白纯化,也有利于工业化规模的低成本蛋白生产。
搜索关键词: 蛋白纯化 目的蛋白 羟基酸 功能片段 工业化规模 表达系统 蛋白生产 低成本 高通量 酸水解 可用 羟基 蛋白
【主权项】:
1.一种蛋白纯化方法,所述方法包含如下步骤:a)在宿主细胞中表达融合蛋白,所述融合蛋白包含目的蛋白、用于纯化的功能片段以及连接所述目的蛋白和所述功能片段的α‑羟基酸;b)使得所述融合蛋白与所述宿主细胞分离;以及c)提供使得所述α‑羟基酸发生水解的环境,将所述目的蛋白与所述功能片段相分离,从而获得纯化的所述目的蛋白,其中,步骤c)中,所述使得所述α‑羟基酸发生水解的环境是pH为9~11的环境;所述水解的时间为1‑48h;所述水解的温度为4‑100℃。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中粮营养健康研究院有限公司;中粮集团有限公司,未经中粮营养健康研究院有限公司;中粮集团有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201611240228.3/,转载请声明来源钻瓜专利网。

同类专利
  • 一种诱导多能干细胞分泌素的制备方法及其应用-201710474825.0
  • 车七石 - 广州润虹医药科技股份有限公司
  • 2017-06-21 - 2019-11-12 - C12P21/00
  • 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种诱导多能干细胞分泌素的制备方法及其应用。本发明提供的诱导多能干细胞分泌素的制备方法,包括诱导多能干细胞处理、诱导多能干细胞增殖、诱导多能干细胞分泌素获取和纯化、浓缩,即通过培养诱导多能干细胞,取上清液,过滤,浓缩得到诱导多能干细胞分泌素。本发明制备方法简单易行,适宜大规模生产,有效提高了诱导多能干细胞分泌素的产量,且本发明制备的诱导多能干细胞分泌素可有效应用于保健品及化妆品中。
  • 一种饲料抗氧化肽制备的工艺-201910560468.9
  • 吴云通;黄贞胜;林鸿荣 - 福建大昌生物科技实业有限公司
  • 2019-06-26 - 2019-11-05 - C12P21/00
  • 本发明公开了一种饲料抗氧化肽制备的工艺,所述饲料抗氧化肽制备的工艺包括以下步骤:S1、原材料预处理:首先将回收的甜高粱秸秆、玉米、麸皮和鱼粉中的杂质清除干净,将甜高粱秸秆、玉米、麸皮和鱼粉经过粉碎之后用加入蒸馏水,搅拌均匀,超声波中分散溶解20‑30分钟,得到混合原料悬浮液A。本发明目的产品活性强,通过此工艺可获得饲料抗氧化肽种类多样,来源广泛,其DPPH·清除率达到70%以上;工艺简单易于实施,本发明只需要经过原料处理和酶解过程即可;抗氧化钛的生产产生的废弃物可用于饲料的原料材料,实现了无废弃物加工,通过本发明可以使原料废弃物的附加值得到很大的提高,实现了饲料抗氧化肽的无废弃物加工。
  • 一种可用于3D打印和伤口修复的纳米二氧化硅复合水凝胶-201610303155.1
  • 吕雅楠;王启刚;胡文 - 同济大学
  • 2016-05-10 - 2019-11-05 - C12P21/00
  • 本发明涉及一种可用于3D打印和伤口修复的纳米二氧化硅复合水凝胶,属高分子生物材料,由末端接有β‑二羟基化合物的纳米二氧化硅作为引发剂和交联剂,以末端接有双键的明胶为单体,将两者均匀分散在水溶液中,在葡萄糖和葡萄糖氧化酶的作用下,通过酶催化自由基聚合制得。通过调节β‑二羟基化合物的纳米二氧化硅、葡萄糖和葡萄糖氧化酶的组分浓度,可以控制在室温下6min~30min内制备得到水凝胶,该水凝胶具有温和高效、机械性能良好、生物相容性强的特点,因此,可用于3D打印和细胞培养,在水凝胶中负载上成纤维细胞生长因子可用在伤口修复等组织工程上。
  • 一种内源性糖改善米渣蛋白功能特性的方法及其产品-201611011429.6
  • 刘刚;胡中泽;秦新光;袁旦;安鑫 - 武汉轻工大学
  • 2016-11-17 - 2019-10-29 - C12P21/00
  • 本发明属于食品科学与工程技术领域,具体涉及一种内源性糖改善米渣蛋白功能特性的方法及其产品。该方法包括步骤:将米渣酶解得到米渣内源性糖份和米渣蛋白份,再将所述米渣内源性糖份与所述米渣蛋白份进行美拉德反应,得到内源性糖的糖基化米渣蛋白。本发明所提供的内源性糖改善米渣蛋白功能特性的方法直接将米渣中的淀粉酶解至糖类,得到米渣蛋白和糖类的混合物,进而通过美拉德反应进行糖基化,得到糖基化米渣蛋白,提高米渣的综合利用率,而不用添加外源糖类。
  • 一种利用外源性糖改善米渣蛋白功能特性的方法及其产品-201611022602.2
  • 刘刚;胡中泽;秦新光;袁旦;王麒 - 武汉轻工大学
  • 2016-11-17 - 2019-10-29 - C12P21/00
  • 本发明属于食品科学与工程技术领域,具体涉及一种利用外源性糖改善米渣蛋白功能特性的方法及其产品。该方法包括以下步骤:1)将米渣蛋白与糖的混合物溶解于蒸馏水中,得到米渣蛋白与糖的混合分散液,调节混合分散液的pH至7.0,并对混合分散液冷冻干燥,得到粉末;2)将步骤1)得到的粉末置于恒温恒湿培养箱中进行反应,得到外源性糖的糖基化米渣蛋白。本发明所提供的糖基化蛋白质不仅在乳化性能方面得到改善,在溶解性、热稳定性、pH以及盐离子稳定性等功能特性方面都有不同程度的提高,对外界环境的变化具有较大的抵抗能力,可作为液态乳制品、肉制品或速溶制品等的原料或添加剂,专用性极强。该方法工艺简单、无环境污染。
  • 一种短肽类发酵产物及其制备方法和应用-201910683957.3
  • 朱虎;王颖璐;常爱平;李丽;鱼晓丹;何侨妹;戴晓芸 - 福建师范大学
  • 2019-07-26 - 2019-10-22 - C12P21/00
  • 本发明公开了一种短肽类发酵产物及其制备方法和应用。其制备方法包括以下步骤:(1)将保藏编号为CCTCC NO:M 2018731的产黄青霉DXY‑1活化后,接种至培养基中,震荡培养65~80h,得种子液;(2)将种子液接种至液体培养基中,震荡培养7~10天后,收集发酵液;(3)破碎发酵液中的菌丝球,再加入乙酸乙酯萃取,收集并浓缩有机相即可。本发明提取得到的发酵产物能治疗铜绿假单胞菌和紫色杆菌引起的感染,在海洋真菌代谢产物中含量相对较高,可以大规模提取。
  • 一种细菌富硒蛋白的制备方法与应用-201910408735.0
  • 王行国;陈昌梅;田金宝;周佳卉;李亚东;朱蓉;喻雪婧 - 湖北大学
  • 2019-05-16 - 2019-10-01 - C12P21/00
  • 本发明公开了一种细菌富硒蛋白的制备方法与应用,本发明利用茶树内生草螺菌较强的硒酸盐还原能力的生物学特性,将茶树内生草螺菌置于含硒酸盐的培养基中生长发酵,茶树内生草螺菌通过硒酸盐还原和硒蛋白合成途径合成高富硒蛋白,蛋白中的硒含量高达1.5μg/mg以上。将制备的可溶性富硒蛋白补进鱼饲料内喂鱼,可溶性富硒蛋白既可为鱼类提供有机硒以增强鱼的抗病性又可为鱼类提供营养素蛋白质,实现养殖鱼类产量和品质的提升,该技术操作简便、成本低廉,绿色环保无公害。
  • 一种黑曲霉发酵法制取亚麻籽粕多肽的方法-201910652073.1
  • 吴广文;张莉莉;宋喜霞;袁红梅;谢冬微;赵德宝 - 黑龙江省农业科学院经济作物研究所
  • 2019-07-18 - 2019-10-01 - C12P21/00
  • 一种黑曲霉发酵法制取亚麻籽粕多肽的方法,它涉及一种亚麻籽粕多肽的制备方法。本发明要解决现有酶解法制备亚麻籽粕多肽存在风味差,安全性不高,周期长,不易操控,成本低的问题,本发明用脱毒(去除生氰糖苷)亚麻籽粕为原料,黑曲霉为发酵菌种,采用微生物发酵方法制备亚麻籽粕多肽,后经真空冷冻干燥处理,得亚麻籽粕多肽粉状产品。与酶解法相比物质风味更好,安全性更高,同时还解决了酶解反应过程中功能物质伴随苦味的缺点,且周期更短,更易操控,成本更低更有利于后续食用产品的开发与生产。本发明应用多肽领域。
  • 交替培养模式同步提高微藻叶黄素和蛋白质产量的方法-201910570076.0
  • 谢友坪;陈剑锋;马瑞娟;刘乐冕;石新国 - 福州大学
  • 2019-06-27 - 2019-09-20 - C12P21/00
  • 本发明涉及一种采用兼养‑自养交替培养模式同步提高微藻叶黄素和蛋白质产量的方法,包括以下步骤:先将藻种接种于种子培养基培养成种子液,再接种于装有发酵培养基的光生物反应器中培养;待发酵培养基中初始氮源浓度降至5~15 mg/L时,开始脉冲流加发酵培养基浓缩液;同时待初始乙酸钠浓度耗尽时,每间隔6‑48 h,向培养液中脉冲流加乙酸钠,使得培养液中的乙酸钠浓度达到0.5‑2 g/L,从而让藻细胞不断处于兼养‑自养交替状态,发酵周期3~9天。采用本发明方法有利于同步提高微藻叶黄素含量和蛋白质含量,且发酵周期短,生产工艺简单,生产成本低,能够显著提高采用微藻同时生产叶黄素和蛋白质的工业化前景。
  • 一种混合菌种固态发酵制备米糠活性肽的方法-201410572733.2
  • 樊金娟;阮燕晔;朱延姝;贾宝艳;崔震海;张立军;朱峰;千智伟 - 沈阳农业大学
  • 2014-10-19 - 2019-09-10 - C12P21/00
  • 本发明公开了一种利用混合菌固态发酵制备米糠活性肽的方法,包括:利用黑曲霉AS3.410、AS3.350、AS3.365和米曲霉AS3.910混合菌种进行米糠的固态发酵培养,首先将斜面菌种活化,生成种子培养基,再将四种菌丝混合接种于已灭菌的米糠中,固态培养,经过分离干燥后得到米糠混合态。本发明选用高产纤维素酶、淀粉酶、果胶酶、糖化酶、脂肪酶和蛋白酶等的复合微生物菌群,通过固态发酵法直接发酵米糠,不仅提高了发酵物的营养水平,同时对某些苦味肽基团进行修饰和重组,使制得的米糠肽基本无苦味和异味,生产工艺简化,可有效降低生产成本,无污染,适合大规模工业化生产米糠活性肽。
  • 芽孢杆菌属微生物的可溶性胞外聚合物的制备方法与应用-201910357924.X
  • 屈庆;李顺灵;李蕾 - 云南大学
  • 2019-04-30 - 2019-08-27 - C12P21/00
  • 本发明公开了芽孢杆菌属微生物的可溶性胞外聚合物的制备方法与应用,属于微生物技术领域。本发明调节Luria‑Bertani液体培养基的pH值为7.0~8.0,高温灭菌后作为Luria‑Bertani液体发酵培养基,采用固体Luria‑Bertani培养基,对芽孢杆菌进行活化培养24~48h后,接种至Luria‑Bertani液体发酵培养基中培养24~36h得到芽孢杆菌属微生物发酵液;将芽孢杆菌属微生物发酵液置于温度为4~8℃条件下离心处理,静置取上层清液,上层清液经透析袋透析即得可溶性胞外聚合物溶液;将可溶性胞外聚合物溶液冷冻干燥得到可溶性胞外聚合物粉末;将可溶性胞外聚合物粉末溶解于蒸馏水中配制成预设浓度的可溶性胞外聚合物水溶液,备用。本发明可溶性胞外聚合物作为一种双功能的生物缓蚀剂和阻垢剂。
  • 一种利用三种糖基转移酶制备Globotriose-连接的活性糖肽的方法-201910441804.8
  • 陈敏;孔蕴;刘芳 - 山东大学
  • 2019-05-24 - 2019-08-13 - C12P21/00
  • 本发明公开了一种利用三种糖基转移酶分步合成法制备含有Globotriose‑连接活性糖肽的方法,首先是利用N‑糖基转移酶ApNGT将UDP‑Glc转移至含有N‑X(X≠P)‑T/S糖基化位点的多肽上的Asn氨基酸残基上,随后在β‑1,4‑半乳糖基转移酶LgtB的作用下合成Peptide‑Lactose,然后在α‑1,4‑半乳糖基转移酶LgtC的作用下合成产物,再使用高压液相色谱进行纯化,洗脱样品浓缩,产物冷冻干燥后即获得具有生物活性的Peptide‑globotriose活性糖肽。本发明方法为大量快速的生产多种基于Globotriose的寡糖肽提供了可能,具有广阔的应用前景。
  • 一种杀虫性融合蛋白的发酵制备方法及其发酵产物的杀虫组合物-201510758768.X
  • 邓青;陈育;李永亮;王广兴;梁兴慧;杜进平;周震 - 北京依科曼生物技术股份有限公司
  • 2015-11-10 - 2019-08-06 - C12P21/00
  • 本发明涉及一种杀虫性融合蛋白的发酵制备方法及其发酵产物的杀虫组合物,属于害虫防治领域,其发酵制备方法包括:融合蛋白种子液的准备、接种融合蛋白种子液,融合蛋白发酵产物大量表达阶段,其特征在于:在步接种融合蛋白种子液之前需要完成发酵培养基的预培养,在融合蛋白发酵产物大量表达阶段具有动态调整的补料的过程,这种制备发酵方法能够实现了来实现蛋白的高效稳定表达。将表达后的产物通过筛选与其相匹配的溶剂、保护剂、乳化剂、分散剂、保湿剂组成杀虫组成物,具有杀虫物质稳定性好、分散效果好、田间实用性强、杀虫广谱的优点,对多种害虫均具有高效灭杀的效果。
  • 一种具有降尿酸功效的美藤果粕生物活性肽的制备方法-201910320558.0
  • 杜冰;温嘉敏;黎攀;田文妮;黄剑钊;赖玉健 - 华南农业大学
  • 2019-04-20 - 2019-07-30 - C12P21/00
  • 本发明公开了一种具有降尿酸功效的美藤果粕生物活性肽的制备方法,包括:(1)美藤果粕前处理:粉碎、脱脂处理,除去有机试剂,加水浸泡得美藤果粕溶液;(2)蛋白酶酶解:加热至40‑60℃,调整pH为2‑11,加入蛋白酶水解,然后高温灭酶,离心,取上清液得粗酶解液;(3)乳酸芽孢杆菌DU‑106发酵:将发酵种子液接种至美藤果蛋白粗酶解液,搅拌混匀,在25℃‑35℃下发酵2‑7天;(4)中和、过滤:将冷却后水解液的pH调为中性,过滤得酶解液;(5)膜分离:过超滤膜,蒸发浓缩,冷冻干燥。本发明利用蛋白酶酶解、乳酸芽孢杆菌DU‑106发酵和超滤分离技术,制备美藤果粕生物活性肽,具有显著降尿酸作用,美藤果粕是美藤果榨油后产生的下脚料,工艺简单、生产成本低、无污染。
  • 一种提高蛋白表达效率的方法及表达载体-201910133891.0
  • 冷毅斌;吴娟;寇小娟 - 武汉巴菲尔生物技术服务有限公司
  • 2019-02-22 - 2019-06-21 - C12P21/00
  • 本发明提供一种提高蛋白表达效率的方法及表达载体,包括:在高密度生长阶段,控制重组毕赤酵母生长阶段的温度为30℃,使用25%氨水和30%磷酸调节pH,使体系的pH控制在5.5,并按预设时间加入10ng/ml‑1μg/ml的褪黑激素;在高效表达阶段,当补料生长阶段结束后,将发酵温度降至22℃,同时流加含12mL/L PTM1的100%的甲醇;控制发酵液中甲醇浓度达到20g/L,诱导90h后结束发酵。不仅可以用于改造任意目的基因以提高其表达效率,还可以用于构建具有高表达效率特征的表达载体,使目的基因的蛋白表达效率提高2~5倍。
  • 用于重组蛋白质的改进的收获操作-201910197577.9
  • M·W·莱尔德;R·圣约翰;J·V·甘森;K·凯尔艾斯;D·纳达拉贾;R·亚当斯;B·R·斯内德克 - 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司
  • 2013-03-14 - 2019-06-14 - C12P21/00
  • 本发明涉及产生重组蛋白质的方法,其包括发酵原核宿主细胞,其中已经用编码所述重组蛋白质的核酸转化所述原核宿主细胞,在dO2水平大于0%的条件下收获所述重组蛋白质,将所述重组蛋白质纯化成的经过滤的储备物,其中通过如IEC测定法在310nm处所测量,所述经过滤的储备物不含有可检测的DHNA‑重组蛋白质加合物。此外,还提供产生重组蛋白质的方法,其包括发酵缺失menE基因的原核宿主细胞,其中已经用编码所述重组蛋白质的核酸转化所述原核宿主细胞,收获所述重组蛋白质,将所述重组蛋白质纯化成经过滤的储备物,其中如通过IEC测定法在310nm处所测量,所述经过滤的储备物不含可检测的DHNA‑重组蛋白质加合物,其中将重组蛋白质产量增加约20%或者更多。
  • 一种玉米肽的制备方法-201910247081.8
  • 韩昕 - 江苏俊启生物科技股份有限公司
  • 2019-03-29 - 2019-05-24 - C12P21/00
  • 本发明提供一种玉米肽的制备方法,包括如下步骤:步骤1:向玉米蛋白粉中加入乙醇水溶液配置底液,水浸泡20‑24h后,100‑120℃蒸煮10‑20min,取出冷却至一定温度,即得玉米蛋白粉质量分数为5%的发酵原料,备用;步骤2:取步骤1得到的质量分数为5%的发酵原料,接种醋酸杆菌种子液,置于培养箱中发酵水解,取出置100‑120℃水浴中加热10‑20min灭酶,然后迅速冷却至室温,4000‑6000r/min离心10‑15min得上清液,即蛋白水解液;步骤3:将步骤2所得蛋白水解液进行凝胶层析分离,收集洗脱液;步骤4:冷冻干燥洗脱液,得到玉米肽。本发明以玉米蛋白粉为基质,应用醋酸杆菌种子液发酵法制备玉米肽,开发出玉米蛋白粉水解度高的方法。
  • 米曲霉发酵虾壳制备抗氧化肽的方法-201610072443.0
  • 于海宁;姚茹;沈生荣 - 浙江工业大学
  • 2016-02-01 - 2019-05-21 - C12P21/00
  • 本发明公开了一种米曲霉发酵虾壳制备抗氧化肽的方法,包括以下步骤:将8~10ml察氏培养基倒入培养皿中,接种米曲霉,于25~28℃培养110~130小时;然后加入10ml蒸馏水混匀,得米曲霉混悬液;先按照虾壳:葡萄糖:水=5g:1~2g:25~30ml的比例配制成发酵基料,然后在发酵基料中加入米曲霉混悬液,于25~28℃发酵28~32天;所得的发酵液离心,收集上清液,经滤纸过滤,再通过孔径为5K的超滤膜,收集滤过液,经活性炭脱色,得活性多肽溶液;所述活性多肽即为抗氧化肽。
  • 抗体人源化改造方法-201811587711.8
  • 高晨阳;陆晓峰;雷鸣;王卓智;李竞;陈智胜 - 上海药明生物技术有限公司
  • 2018-12-25 - 2019-04-16 - C12P21/00
  • 本发明公开一种抗体人源化改造方法,使用N‑糖苷酶处理抗体人源化改造过程中的经纯化后的IgG抗体蛋白;所述N‑糖苷酶为PNGaseF酶,所述PNGaseF酶特异性识别蛋白中的序列Asn‑X‑Ser/Thr,完全去除糖基化的同时保留抗体蛋白中的二硫键;X代表除了脯氨酸外任意一种氨基酸。本发明还提供上述方法的具体应用。本发明的方法能够有效的对现有技术中部分抗体在抗体人源化改造后期时仍存在的无法替换的氨基酸进行替换。通过上述方法,可以尽可能多的保留经过筛选且合适的人源序列、降低免疫反应的目的,同时又能够最大限度的保留其特异性和亲和力,从而达到合理的人源化的效果。
  • 一种用于乙型肝炎康复的植物活性肽及其制备方法、用途-201811506481.8
  • 王召利 - 王召利
  • 2018-12-10 - 2019-04-02 - C12P21/00
  • 本发明实施例涉及植物活性肽技术领域,具体涉及一种用于乙型肝炎康复的植物活性肽及其制备方法、用途。所述用于乙型肝炎康复的植物活性肽的制备原料包括:120‑150重量份荞麦、80‑90重量份山楂、20‑25重量份虎杖、10‑15重量份当归、10‑15重量份五味子、10‑15重量份黄菊、10‑15重量份三七、10‑15重量份甘草、10重量份戊聚糖。本发明实施例提供的用于乙型肝炎康复的植物活性肽及其制备方法、用途具有如下优点:原料为药食同源材料,安全、长期服用无毒副作用;制备方法简单,易于工业化操作;疗效显著,为乙型肝炎患者提供了一种新的康复产品。
  • 用于重组蛋白质的改进的收获操作-201380027623.1
  • M·W·莱尔德;R·圣约翰;J·V·甘森;K·凯尔艾斯;D·纳达拉贾;R·亚当斯;B·R·斯内德克 - 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司
  • 2013-03-14 - 2019-04-02 - C12P21/00
  • 本发明涉及产生重组蛋白质的方法,其包括发酵原核宿主细胞,其中已经用编码所述重组蛋白质的核酸转化所述原核宿主细胞,在dO2水平大于0%的条件下收获所述重组蛋白质,将所述重组蛋白质纯化成的经过滤的储备物,其中通过如IEC测定法在310nm处所测量,所述经过滤的储备物不含有可检测的DHNA‑重组蛋白质加合物。此外,还提供产生重组蛋白质的方法,其包括发酵缺失menE基因的原核宿主细胞,其中已经用编码所述重组蛋白质的核酸转化所述原核宿主细胞,收获所述重组蛋白质,将所述重组蛋白质纯化成经过滤的储备物,其中如通过IEC测定法在310nm处所测量,所述经过滤的储备物不含可检测的DHNA‑重组蛋白质加合物,其中将重组蛋白质产量增加约20%或者更多。
专利分类
×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

400-8765-105周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top