[发明专利]一种洛美沙星免疫原及其制备方法和检测试纸卡

摘要

本发明提供的一种洛美沙星免疫原，具有式I所示结构。本发明提供的一种洛美沙星免疫原的制备方法，洛美沙星上羧基进行C链衍生化，同时BSA使用糖基化修饰法进行活化，再利用碳二亚胺两步法合成免疫，制备出的免疫原具有偶联率高、免疫性强的特点。本发明还提供的一种检测洛美沙星用试纸卡，具有检测速度快，灵敏度高，所述试纸卡的检测限可达0.3ng/ml，同时满足快速检测的要求。

主权项

1.一种检测洛美沙星用试纸卡，包括卡壳、底板、样品垫、金标垫、检测和吸水区，所述检测区设有检测线T和质控线C，其特征在于，所述检测线T位置包被有洛美沙星包被原，所述质控线C位置包被有兔抗IgG，所述金标垫附着有金标记的洛美沙星单克隆抗体；所述金标记的洛美沙星单克隆抗体是由洛美沙星‑牛血清白蛋白免疫原免疫小鼠得到的细胞株分泌产生；所述洛美沙星‑牛血清白蛋白免疫原，具有式I所示结构：所述洛美沙星‑牛血清白蛋白免疫原的制备方法，包括以下步骤：1)将氨基戊酸和洛美沙星在缓冲溶液体系中进行脱水缩合反应，将得到的反应液依次进行萃取和反萃取，得到碳链延伸的LOM半抗原；2)将所述步骤1)得到的碳链延伸的LOM半抗原溶于N，N‑二甲基甲酰胺，得到碳链延伸的LOM半抗原溶液；将N‑羟基琥珀酰亚胺和1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐与所述碳链延伸的LOM半抗原溶液混合，避光反应，得到活化的LOM半抗原；3)将牛血清白蛋白、葡萄糖和磷酸缓冲液混合，调节混合液的pH值至9.0～10，在振荡条件下反应，得到活化的cBSA；4)将所述步骤3)中得到的活化的cBSA溶解于含有N，N‑二甲基甲酰胺的磷酸盐缓冲溶液中，得到cBSA溶液；5)将所述步骤2)得到的活化的LOM半抗原滴加到所述步骤4)得到的cBSA溶液中，在振荡条件下反应，得到具有式I所示结构的洛美沙星‑牛血清白蛋白免疫原：所述步骤1)～2)与步骤3)之间没有时间顺序的限制；所述洛美沙星包被原为洛美沙星‑鸡卵清白蛋白偶联物；所述洛美沙星包被原的制备方法包括以下步骤：将洛美沙星与甲醇、DMF和PBS溶液混合，得到LOM混合液；将鸡卵清白蛋白与PBS缓冲液混合，得到OVA溶液；将所述LOM混合液、OVA溶液和戊二醛溶液混合，在避光条件下置换反应，得到LOM包被原。