[发明专利]一种非定向交尾凡纳滨对虾全同胞家系批量制备方法

摘要

本发明公开了一种非定向交尾凡纳滨对虾全同胞家系批量制备方法。本发明针对现有的凡纳滨对虾家系制备技术的缺陷，设计通过非定向交尾、剪取对虾胡须组织提取DNA、取产卵后雌虾纳精囊中的剩余精荚作为父本来源的依据等方法，利用目前较为成熟的微卫星亲子鉴定技术确定父母本个体，制备出全同胞家系。本发明的方法采用非定向随机交配效率高与微卫星亲子鉴定准确率高相结合的方法，弥补了现有凡纳滨对虾家系制备技术的不足，将有利于凡纳滨对虾遗传育种工作的进行。

主权项

1.一种非定向交尾凡纳滨对虾全同胞家系批量制备方法，其特征在于，包括以下步骤：a、亲本选择：选择雄虾20g以上，雌虾30g以上的健康个体作为亲本；b、亲本处理：去除雌虾一侧眼柄，雄虾不去除眼柄，将所有雌虾与雄虾个体的一侧胡须靠近根部剪下，剪下的胡须分别单独保存；c、亲虾饲养：将步骤b的雌虾和雄虾分别在雌虾池和雄虾池中饲养；d、亲虾交配：在上午将步骤c中的性腺饱满的雌虾放入雄虾池，使之自由追逐、交配；e、雌虾挑选：当晚18时至21时，全部捞出雄虾池中的雌虾进行逐个检查，将雌虾纳精囊中具有饱满精荚的雌虾放在单独的水体中产卵，微充气；将纳精囊中没有精荚或精荚位置偏离纳精囊的雌虾全部放回雌虾池中；f、产卵处理：发现雌虾产卵后立即捞出，将产卵后的雌虾另一侧胡须剪下分别单独保存，将产卵后雌虾纳精囊中剩余的精荚液氮保存，处理完后将雌虾放回雌虾池中；g、亲本追溯：提取所有亲本胡须的DNA，提取产卵雌虾胡须DNA作为母本DNA；提取产卵后雌虾纳精囊中的剩余精荚DNA作为父本DNA；利用微卫星引物确定父母本；h、家系培育：对确定父本和母本来源的卵进行培育，得到全同胞家系。