[发明专利]一种磷酸盐诱导启动子降低黑曲霉β-葡萄糖苷酶表达酶活的方法有效
| 申请号： | 201611159365.4 | 申请日： | 2016-12-15 |
| 公开（公告）号： | CN106520822B | 公开（公告）日： | 2019-10-11 |
| 发明（设计）人： | 薛栋升;梁龙元 | 申请（专利权）人： | 湖北工业大学 |
| 主分类号： | C12N15/80 | 分类号： | C12N15/80;C12N1/15;C12R1/685 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 常海涛 |
| 地址： | 430068 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种磷酸盐诱导启动子降低黑曲霉β‑葡萄糖苷酶表达酶活的方法，属于基因工程领域。本发明方法包括如下步骤：（1）将由磷酸盐诱导启动子或含磷酸盐诱导启动子的DNA序列、表达与β‑葡萄糖苷酶mRNA互补的反义mRNA的DNA序列和终止子序列组成的DNA片段构建到表达载体上；（2）将步骤（1）所构建的重组载体转化到黑曲霉中；（3）往培养基中加入磷酸盐后对转化有重组载体的黑曲霉菌株进行培养。本发明利用磷酸盐诱导启动子调控β‑葡萄糖苷酶mRNA互补的反义mRNA转录，有效降低了β‑葡萄糖苷酶的翻译量和表达的活性，从而优化了黑曲霉表达的纤维素酶系组合，以最大化发挥纤维素酶系降解纤维素的效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 磷酸盐 诱导 启动子 降低 曲霉 葡萄 糖苷酶 表达 方法 | ||
【主权项】：
1.一种磷酸盐诱导启动子降低黑曲霉β‑葡萄糖苷酶表达酶活的方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）将由含磷酸盐诱导启动子的DNA序列、表达与β‑葡萄糖苷酶mRNA互补的反义mRNA的DNA序列和终止子序列组成的DNA片段构建到表达载体上；所述的含磷酸盐诱导启动子的DNA序列如SEQ ID NO.1所示，所述的表达与β‑葡萄糖苷酶mRNA互补的反义mRNA的DNA序列如SEQ ID NO.2所示，所述的终止子序列如SEQ ID NO.3所示；（2）将步骤（1）所构建的重组载体转化到黑曲霉ATCC16404中；（3）往培养基中加入磷酸盐后对转化有重组载体的黑曲霉菌株进行培养。
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