[发明专利]一种定向快速筛选产胆盐水解酶植物乳杆菌的方法在审
| 申请号： | 201611111579.4 | 申请日： | 2016-12-06 |
| 公开（公告）号： | CN108148773A | 公开（公告）日： | 2018-06-12 |
| 发明（设计）人： | 丁轲;陈亚茹;刘炜;余祖华;李旺;李元晓;何万领;曹平华;赵龙妹;王玉琴;张春杰;程相朝 | 申请（专利权）人： | 河南科技大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12R1/25 |
| 代理公司： | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人： | 胡云飞 |
| 地址： | 471003 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种定向快速筛选产胆盐水解酶植物乳杆菌的方法，属于微生物技术领域。该方法包括以下步骤：1)以样品宏基因组DNA为模板，利用引物对BSHL/BSHR进行PCR扩增，筛选出具有BSH基因的样品；2)以上述样品为分离对象，纯化得到疑似植物乳杆菌的菌株；3)以菌株基因组DNA为模板，利用引物对BSHL/BSHR进行PCR扩增，筛选得到具有BSH基因的疑似菌株；4)取上述菌株进行分子鉴定，筛选得到产胆盐水解酶的植物乳杆菌。该方法通过第一步宏基因组特异性片段的扩增，就能将绝大多数不含产BSH的植物乳杆菌样品滤除，避免了盲目筛选，大大缩小了筛选范围，具有定向、快速、简便、工作量小等特点。 | ||
| 搜索关键词： | 植物乳杆菌 筛选 胆盐水解酶 菌株 宏基因组 快速筛选 引物 微生物技术领域 菌株基因组DNA 特异性片段 分离对象 分子鉴定 基因 扩增 滤除 工作量 | ||
【主权项】：
一种定向快速筛选产胆盐水解酶植物乳杆菌的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)以样品宏基因组DNA为模板，利用引物对BSHL/BSHR进行PCR扩增，筛选出具有BSH基因的样品；2)以上述样品为分离对象，纯化得到疑似植物乳杆菌的菌株；3)以菌株基因组DNA为模板，利用引物对BSHL/BSHR进行PCR扩增，筛选得到具有BSH基因的疑似植物乳杆菌菌株；4)取上述菌株进行分子鉴定，筛选得到产胆盐水解酶的植物乳杆菌；步骤1)、3)中引物对BSHL/BSHR为：BSHL：5’‑AACTGCAGATGTGTGTACTGCCATAACT‑3’；BSHR：5’‑GGAATTCTTAGTTAACTGCATAGTATTGTG‑3’。
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