[发明专利]一种治疗脑部损伤类疾病的神经干细胞注射液

摘要

本发明涉及一种源于人胎脑皮层来源、用于治疗各种脑损伤的神经干细胞注射液，所述神经干细胞注射液中至少包含1×106个神经干细胞。其中所述的神经干细胞为废弃胎脑皮层组织分离培养的神经干细胞，该神经干细胞培养经过组织分离和原代细胞获得培养，神经干细胞纯化及扩大培养，神经干细胞工作细胞库的建立及神经干细胞注射液的制备等步骤。细胞可在无血清培养体系下扩增5000倍。根据细胞使用情况，将种子细胞P5代神经干细胞复苏，计数并无血清培养基悬浮培养，细胞消化传代，如此反复直至细胞传代P9代。此神经干细胞注射液纯度在95％，可用于治疗脑中风，缺血缺氧型脑损伤，小儿脑瘫等多种脑损伤疾病。

主权项

一种治疗脑部损伤类疾病的神经干细胞注射液的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：S1：原代细胞培养：将原代神经干细胞用无血清培养基对细胞悬液进行培养扩增；S2：神经干细胞纯化及扩大培养：将扩增融合到80％‑90％的原代神经干细胞进行消化、传代，直至传到第5代,并鉴定细胞纯度达95％以上后，作为种子细胞；S3：神经干细胞工作细胞库的建立：将步骤S2中的种子细胞，计数并无血清培养基悬浮培养，待培养瓶细胞融合到80％—90％，将细胞消化传代，如此反复直至细胞传代P6‑P9代；S4：神经干细胞注射液的制备：将步骤S3中的P6‑P9代细胞加生理盐水定容或负载于微载体，制成临床用神经干细胞注射液。