[发明专利]双蓝染色法

摘要

一种双蓝染色法，将生物学样品先与考马斯亮蓝染液在将所述生物学样品的细胞结构染色的条件下接触，且后与乳酸酚棉兰染液在将所述生物学样品的细胞结构染色的条件下接触；先将植物叶片中的蛋白质用考马斯亮蓝染色，形成的蛋白质‑色素结合物呈现青色，而寄生在植物上的真菌的闭囊壳和附属丝的细胞壁的主要化学成分为壳多糖，不与考马斯亮蓝结合；然后使用乳酸酚棉兰染液将真菌菌丝体和附属丝等染成深蓝色，部分产孢结构显棕褐色，最终得到的结果是寄主植物细胞呈现青色或亮蓝色，菌丝体呈现深蓝色，产孢结构如果以硬壁细胞为主，则显棕褐色，闭囊壳及附属丝为棕褐色，尤其使较细的附属丝影像更加清晰，具有非常好的层次感。

主权项

1.一种双蓝染色法，其特征在于：将生物学样品先与考马斯亮蓝染液在将所述生物学样品的细胞结构染色的条件下接触，且后与乳酸酚棉兰染液在将所述生物学样品的细胞结构染色的条件下接触；将生物学样品与考马斯亮蓝染液在将所述生物学样品的细胞结构染色的条件下接触后，使用考马斯亮蓝脱色液与生物学样品接触，即将没有和所述生物学样品细胞结构结合的考马斯亮蓝染液洗脱；将生物学样品与乳酸酚棉兰染液在将所述生物学样品的细胞结构染色的条件下接触后，使用乳酸酚棉兰脱色液与生物学样品接触，即将没有和所述生物学样品细胞结构结合的乳酸酚棉兰染液洗脱；所述将生物学样品先与考马斯亮蓝染液在将所述生物学样品的细胞结构染色的条件下接触步骤之前，将生物学样品与固定液接触；所述固定液包括甘油；其中，本方法具体为：取材：切取被真菌寄生的植物部位放置于载玻片上，得到生物学样品；固定：将生物学样品置于固定液中，去除多余的固定液后，得到固定后的生物学样品；考马斯亮蓝染色：在固定后的生物学样品上滴加考马斯亮蓝染液进行染色，以使被真菌寄生的植物部位呈现青色或亮蓝色，去除多余的考马斯亮蓝染液后，得到考马斯亮蓝染色后的生物学样品；考马斯亮蓝脱色：在考马斯亮蓝染色后的生物学样品上滴加考马斯亮蓝脱色液进行脱色，去除多余的考马斯亮蓝脱色液后，得到考马斯亮蓝脱色后的生物学样品；乳酸酚棉兰染色：在考马斯亮蓝脱色后的生物学样品上滴加乳酸酚棉兰染液进行染色，以使考马斯亮蓝脱色后的生物学样品中的菌体组织中的菌丝呈现深蓝色、菌体组织中的闭囊壳和附属丝呈现棕褐色，去除多余的乳酸酚棉兰染液后，得到乳酸酚棉兰染色后的生物学样品；乳酸酚棉兰脱色：在乳酸酚棉兰染色后的生物学样品上滴加乳酸酚棉兰脱色液进行脱色，去除多余的乳酸酚棉兰脱色液后，得到具有颜色层次感的乳酸酚棉兰脱色后的生物学样品；封片：将乳酸酚棉兰脱色后的生物学样品晾干后滴加中性胶封片。